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旋毛虫抗原基因Ts43原核表达及重组蛋白鉴定
引用本文:任道锋,崔晶,王中全,韩化敏.旋毛虫抗原基因Ts43原核表达及重组蛋白鉴定[J].中国人兽共患病杂志,2008,24(6):539-542.
作者姓名:任道锋  崔晶  王中全  韩化敏
作者单位:[1]郑州大学医学院寄生虫学教研室,郑州450052 [2]江苏省太仓市疾病预防控制中心,太仓215400
基金项目:国家自然科学基金 , 河南省医学科技人才创新工程项目
摘    要:目的原核表达旋毛虫相对分子质量(Mr)43000抗原基因(Ts43)并对重组蛋白进行抗原性鉴定。方法将旋毛虫抗原基因Ts43克隆入原核表达载体pET30a(+),构建重组表达质粒pET30a(+)-Ts43,经测序分析正确后转化大肠埃希菌BL21,以异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹分析(Western blotting analysis)鉴定重组蛋白的抗原性。结果SDS-PAGE结果显示表达产物为Mr 41000的重组融合蛋白,IPTG诱导4h时表达量最大,薄层凝胶光密度扫描显示表达的融合蛋白占菌体蛋白总量的14.7%。Western blotting结果显示该重组蛋白可被旋毛虫、乡土旋毛虫及纳氏旋毛虫感染小鼠血清及旋毛虫病患者血清识别,与人芽囊原虫、微小隐孢子虫感染小鼠和正常小鼠血清和正常人血清无交叉反应,但与棘球蚴病、囊尾蚴病、日本血吸虫病、并殖吸虫病及华支睾吸虫病患者血清均有交叉反应。结论旋毛虫Ts43基因的重组蛋白具有较好的抗原性,但与某些寄生虫病患者血清有交叉反应。

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文章编号:1002-2694(2008)06-0539-04
修稿时间:2007年12月14

Prokaryotic expression of the antigen gene Ts43 of Trichinella spiralis and identification of its recombinant protein
REN Dao-feng,CUI Jing,WANG Zhong-quan,HAN Hua-min.Prokaryotic expression of the antigen gene Ts43 of Trichinella spiralis and identification of its recombinant protein[J].Chinese Journal of Zoonoses,2008,24(6):539-542.
Authors:REN Dao-feng  CUI Jing  WANG Zhong-quan  HAN Hua-min
Abstract:
Keywords:
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