| 基于ITS2序列鉴定苗药金铁锁及其混伪品 |
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| 作者姓名： | 宋明 张婉冰 张雅琴 孙伟 向丽 石晋丽 马孝熙 王俊 樊佳佳 张晓存 刘霞 |
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| 作者单位： | 武汉理工大学化学化工与生命科学学院 武汉 430070;武汉理工大学化学化工与生命科学学院 武汉 430070;武汉理工大学化学化工与生命科学学院 武汉 430070;中国中医科学院中药研究所 北京 100700;中国中医科学院中药研究所 北京 100700;北京中医药大学中药学院 北京 100102;武汉理工大学化学化工与生命科学学院 武汉 430070;武汉理工大学化学化工与生命科学学院 武汉 430070;武汉理工大学化学化工与生命科学学院 武汉 430070;武汉理工大学化学化工与生命科学学院 武汉 430070;武汉理工大学化学化工与生命科学学院 武汉 430070;中国中医科学院中药研究所 北京 100700 |
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| 基金项目： | 科学技术部国家重大新药创制科技专项（2014ZX09304307001020）：中药新药安全性检测技术与标准研究,负责人：肖红斌;武汉理工大学本科生自主创新基金（2014-HG-B1-07）：苗药金铁锁提取工艺研究,负责人：刘霞;贵州省科技厅市院科合作项目（2012-1）：毕节药用植物资源调查收集及DNA条形码研究,负责人：罗焜。 |
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| 摘 要： | 目的：本研究利用ITS2序列对苗药金铁锁及其混伪品进行鉴定研究,从而确保药材质量,保障临床用药安全。方法：提取金铁锁药材及其混伪品基因组DNA,PCR扩增并双向测序获得ITS2序列。所有序列经过CodonCode Aligner V3.7.1拼接后,采用MEGA5.1软件进行序列比对,计算种内和种间Kimura2-Parameter（K2P）遗传距离,并构建系统发育树。采用相似性搜索法、最近距离法、邻接（NJ）树法对ITS2序列鉴定能力进行评估。结果：金铁锁药材的ITS2序列长度为229 bp,其ITS2序列种内最大K2P遗传距离小于与混伪品的最小种间K2P遗传距离;应用相似性搜索法表明ITS2序列能够准确鉴定金铁锁药材及其混伪品;基于ITS2序列构建NJ树,金铁锁及其混伪品均表现出良好单系性,均能明显区分。结论：ITS2序列能够稳定、准确地鉴定金铁锁药材及其混伪品,DNA 条形码技术可为金铁锁药材及其混伪品的鉴定提供新的方法。
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| 关 键 词： | 金铁锁 ITS2 鉴定 混伪品 |
| 收稿时间： | 2014-08-05 |
| 修稿时间： | 2014-08-15 |
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