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曲古抑菌素A增加人肝癌Bel7402细胞对TRAIL敏感度的实验
引用本文:李伟,朱明月,董栩,夏华,陈栘,鲁琰,郭峻莉,谢协驹,符史干. 曲古抑菌素A增加人肝癌Bel7402细胞对TRAIL敏感度的实验[J]. 肿瘤防治研究, 2015, 42(6)
作者姓名:李伟  朱明月  董栩  夏华  陈栘  鲁琰  郭峻莉  谢协驹  符史干
作者单位:1. 571199海口,海南医学院海南省肿瘤发生和干预重点实验室;571199海口,海南医学院分子生物学重点实验室
2. 海南医学院海南省肿瘤发生和干预重点实验室,海口,571199
3. 571199海口,海南医学院海南省肿瘤发生和干预重点实验室;571199海口,海南医学院病理生理学教研室
4. 海南医学院生理学教研室,海口,571199
摘    要:
目的 探讨曲古抑菌素A(Trichostatin A,TSA)联合肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)相关凋亡诱导配体(TNF related apoptosis inducing ligand,TRAIL)对肝癌细胞Bel7402增殖凋亡的影响及其机制.方法 采用四甲基偶氮唑盐(MTT)染色法分别检测TSA、TRAIL及低浓度TSA联合TRAIL处理Bel7402细胞的生长抑制率;4,6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐(DAPI)染色法对药物联合处理后的细胞进行凋亡形态学观察;免疫细胞化学和Western blot技术观察药物联合作用后p65蛋白在细胞中表达和定位的变化.结果 不同浓度TSA作用6、12和24 h对人肝癌Bel7402细胞的增殖没有明显抑制作用,而作用48 h后的细胞增殖抑制率明显升高,和对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);不同浓度TRAIL处理Bel7402细胞存活率没有明显改变;低浓度TSA(20 ng/ml)预处理能够增加Bel7402细胞对TRAIL治疗的敏感度,TSA预处理联合TRAIL(100ng/ml)作用细胞24 h后,细胞生存率为(57.1±5.4)%,和单独药物处理组及对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);DAPI染色显示TSA和TRAIL联合作用后Bel7402细胞有核凋亡出现.荧光显微镜观察证明单独应用TSA(200 ng/ml)或TRAIL(100 ng/ml)处理的细胞p65蛋白有部分核内移位,而两种药物联合应用导致p65蛋白表达量降低,并且发生明显的核内转移和集聚.结论 低浓度TSA能够增加肝癌Bel7402细胞对TRAIL的敏感度;其机制可能是两种药物联合应用降低p65的表达和活性,从而诱导Bel7402细胞凋亡.

关 键 词:肝细胞癌细胞  曲古抑菌素A  肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体  细胞凋亡

Trichostatin A Increases Sensitivity of Hepatocellular Carcinoma Cells Bel7402 to TRAIL
Abstract:
Keywords:Hepatocellular carcinoma cells  Trichostatin A(TSA)  TNF related apoptosis inducing ligand(TRAIL)  Apoptosis
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