神经生长因子及其受体调节胶质瘤细胞Warburg效应促进其转移的作用机制研究

目的：探究神经生长因子（nervegrowthfactor,NGF）及其受体调节胶质瘤细胞Warburg效应促进其转移的作用机制。方法：Westernblot和实时荧光定量PCR检测3株胶质瘤细胞中NGF以及TrkA的蛋白及mRNA水平。以U251为实验细胞,将U251分为Control组和NGF组,50μg/L的NGF干预。CCK-8检测细胞活力,PI染色后流式细胞术检测细胞周期的变化,Tran－swell小室实验检测细胞的侵袭能力,Westernblot检测神经生长因子受体（growthfactorreceptor,TrkA）、AKT、PI3K以及代谢酶磷酸果糖激酶（Phosphofructokinase,PFK）、丙酮酸激酶M2（pyruvatekinaseM2,PKM2）的表达水平,检测葡萄糖摄取水平、乳酸水平、细胞氧耗水平。将U251细胞分为为Control组、AKTinhibitor组和NGF组,Control组为常规培养细胞,AKTinhibitor组为AKT抑制剂预处理后再使用50μg/L的NGF干预,而NGF组为50μg/L的NGF干预。同样进行上述检测。结果：胶质瘤细胞中NGF和TrkA水平高于胶质细胞,其中U251水平最高。NGF干预后,U251细胞活力增高,NGF组细胞中G2期明显高于Control组,NGF组细胞的侵袭数目明显高于Control组,NGF组细胞中TrkA、AKT、PI3K的蛋白水平明显高于Control组。而代谢酶PFK、PKM2的表达水平明显低于Control组。NGF组细胞葡萄糖摄取水平、乳酸水平、细胞氧耗水平相比Control组具有明显差异。AKT信号抑制后,NGF组细胞活力高于Control组、AKTinhibitor组,NGF组细胞中G2期比例明显高于Control组和AKTinhibitor组。NGF组细胞的侵袭数目明显高于Control组和AKTinhibitor组,NGF组细胞中TrkA、AKT、PI3K的蛋白水平明显高于Control组和AKTinhibitor组。而代谢酶PFK、PKM2的表达水平明显低于Control组和AKTinhibitor组。NGF组细胞葡萄糖摄取水平、乳酸水平、细胞氧耗水平相比Control组和AKTinhibitor组具有明显差异。结论：NGF可以通过TrkA-PI3K/AKT信号促进胶质瘤细胞Warburg效应,促进其转移。