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水蛭素衍生物基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达
引用本文:罗春贞,顾银良,宋后燕. 水蛭素衍生物基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达[J]. 复旦学报(医学版), 1996, 0(3)
作者姓名:罗春贞  顾银良  宋后燕
作者单位:上海医科大学基础医学院分子遗传学研究室
摘    要:
制备水蛭素衍生物,首次按照天然水蛭素分子中的氨基酸顺序,设计了水蛭素的基因,基因中融合了RGD三肽编码顺序,形成水蛭素衍生物编码基因,用DNA合成仪,分10个寡核苷酸合成水蛭素衍生物基因。其中6个寡核苷酸组成外端大片段,4个寡核苷酸组成C-端大片段。各大片段与载体pUC19重组和无性繁殖后,通过KpnⅠ位点连接成编码水蛭素衍生物分子的完整基因。经核苷酸顺序分析证实后,水蛭素衍生物基因与表达载体重组,转化大肠杆菌,筛选含重组质粒的细菌,命名为pSGHRE。结果:pSGHRE菌破碎后,上清和沉淀部分都有水蛭素活性。上清活性约20ATU/ml菌液。结论:我们构建了水蛭素衍生物基因的克隆并在大肠杆菌中得到表达。

关 键 词:水蛭素衍生物,基因克隆,原核表达

MOLECULAR CLONING OF HIRUDIN DERIV ATIVE AND EXPRESSON IN E.COLI
Luo Chunzhen,Gu Yingliang,Song Houyan. MOLECULAR CLONING OF HIRUDIN DERIV ATIVE AND EXPRESSON IN E.COLI[J]. Fudan University Journal of Medical Sciences, 1996, 0(3)
Authors:Luo Chunzhen  Gu Yingliang  Song Houyan
Abstract:
Keywords:hirudin derivative  gene cloning  prokaryotic expression
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