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热休克蛋白65及其融合蛋白Hsp65-6×P277的分离纯化和稳定性研究
引用本文:陈庆梅 吴国君 吴洁 李泰明 曹荣月 刘景晶. 热休克蛋白65及其融合蛋白Hsp65-6×P277的分离纯化和稳定性研究[J]. 药物生物技术, 2007, 14(4): 249-254
作者姓名:陈庆梅 吴国君 吴洁 李泰明 曹荣月 刘景晶
作者单位:中国药科大学生命科学与技术学院,江苏南京210009
基金项目:This work was supported by China National Natural Science Fund Committee (Grant No. 30500458).
摘    要:来源于牛分枝杆菌的热休克蛋白65(Hsp65)在没有佐剂的情况下可作为载体分子将抗原表位递呈给免疫系统。热休克蛋白具有蛋白酶的催化活性,容易发生自溶而降解,这制约了基于Hsp65疫苗的研究。该研究中,建立了纯化Hsp65及其融合蛋白Hsp65-6×P277(P277为来源于人热休克蛋白60的肽段,线性重复6次)的方法。Hsp65与Hsp65—6×P277以可溶形式表达于大肠杆菌。在低温及添加EDTA的条件下经细胞裂解、硫酸铵沉淀及阴离子交换树脂等纯化方法,可得到电泳纯的目的蛋白。用纯化的融合蛋白Hsp65-6×P277免疫小鼠,可激发机体产生强烈的免疫应答,该融合蛋白有希望作为免佐剂的糖尿病疫苗加以进一步研究开发。

关 键 词:热休克蛋白65(Hsp65) 融合蛋白 纯化 降解 稳定性
文章编号:1005-8915(2007)04-0249-06
修稿时间:2006-03-21

Purification and Stability Heat Shock Protein 65 and Its Research of Mycobacterial Fusion Protein Hsp65-6 P277
CHEN Qing-mei, WU Guo-jun, WU Jie, LI Tai-ming, CAO Rong-yue, LIU Jing-jing. Purification and Stability Heat Shock Protein 65 and Its Research of Mycobacterial Fusion Protein Hsp65-6 P277[J]. Pharmaceutical Biotechnology, 2007, 14(4): 249-254
Authors:CHEN Qing-mei   WU Guo-jun   WU Jie   LI Tai-ming   CAO Rong-yue   LIU Jing-jing
Affiliation:School of Life Science and Technology, China Pharmaceutical University, Nanjing, 210009, China
Abstract:
Keywords:Heat shock protein 65 (Hsp65)   Fusion protein   Purification   Degradation   Stability
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