| 不同来源葡萄糖氧化酶的分离纯化及其生物催化特性 |
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| 引用本文： | 王文婷,赵伟,章魁普,黎亮,郭美锦. 不同来源葡萄糖氧化酶的分离纯化及其生物催化特性[J]. 医学教育探索, 2016, 0(4): 484-491 |
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| 作者姓名： | 王文婷 赵伟 章魁普 黎亮 郭美锦 |
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| 作者单位： | 华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室, 上海 200237,山东福洋生物科技有限公司, 山东 德州 253100,华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室, 上海 200237,华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室, 上海 200237,华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室, 上海 200237 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展（863）计划（2014AA021705） |
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| 摘 要： | ![]()
采用离子交换层析法对4种不同来源的葡萄糖氧化酶（Glucose oxidase, GOD，EC 1.1.3.4）进行分离纯化，纯化后酶的相对分子质量约为130 kDu，为双亚基酶。纯化后的4种酶的酶学性质相对稳定，对pH有较宽的响应范围。温度为20～50℃时，随着温度的升高酶活降低且稳定性较好；温度为55℃时稳定性较差；而在60℃时则失活。金属离子如Fe2+、Co2+、Mg2+和Cu2+对4种酶都有较强的抑制作用，Fe2+的抑制尤其明显，而螯合剂EDTA可以激活酶的活性。在30℃、pH为7.0的条件下，以不同浓度（20～100 mmol/L）的葡萄糖为底物分别测定4种酶的米氏常数（Km）和催化常数（Kcat）。通过光谱和色谱对4种葡萄糖氧化酶进行检测，虽然氨基酸组成有明显不同，但二维结构基本一致，而GOD前体goxC和修饰蛋白如过氧化氢酶、过氧化氢酶前体和Pc16g04630等可能是提高GOD催化效率和工业应用的分子基础。
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| 关 键 词： | 葡萄糖氧化酶 纯化 生物催化特性 氨基酸序列分析 |
| 收稿时间： | 2015-12-07 |
Purification and Biocatalytic Properties of Glucose Oxidases from Different Sources |
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| WANG Wen-ting,ZHAO Wei,ZHANG Kui-pu,LI Liang and GUO Mei-jin. Purification and Biocatalytic Properties of Glucose Oxidases from Different Sources[J]. Researches in Medical Education, 2016, 0(4): 484-491 |
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| Authors: | WANG Wen-ting ZHAO Wei ZHANG Kui-pu LI Liang GUO Mei-jin |
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| Affiliation: | State Key Laboratory of Bioreactor Engineering, East China University of Science and Technology, Shanghai 200237, China,Shandong Fuyang Biology Company, Dezhou 253100, Shandong, China,State Key Laboratory of Bioreactor Engineering, East China University of Science and Technology, Shanghai 200237, China,State Key Laboratory of Bioreactor Engineering, East China University of Science and Technology, Shanghai 200237, China and State Key Laboratory of Bioreactor Engineering, East China University of Science and Technology, Shanghai 200237, China |
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| Abstract: | ![]()
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| Keywords: | glucose oxidase purification biocatalytic properties amino acid residue analysis |
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