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利用杆状病毒载体在家蚕幼虫中高效表达人胰岛素样生长因子-2(hIGF-2)
引用本文:段宇,汪承亚,赵红,张志芳,陈家伟. 利用杆状病毒载体在家蚕幼虫中高效表达人胰岛素样生长因子-2(hIGF-2)[J]. 中国药科大学学报, 2002, 33(2): 78-82
作者姓名:段宇  汪承亚  赵红  张志芳  陈家伟
作者单位:1. 南京医科大学第一附属医院,南京,210029
2. 中国农业科学研究院镇江蚕业研究所,镇江,212008
3. 荷兰Utrecht大学病理生理实验室,荷兰阿姆斯特丹)
基金项目:国家自然科学基金资助项目 (课题号 39770 355)
摘    要:目的 :研制有生物活性的可溶性分泌型重组人胰岛素样生长因子 -2 (rh IGF-2 )。方法 :将 14 k Dh IGF -2前体 c DNA基因插入家蚕核型多角体病毒 (Bm NPV )转移载体 p Bak PAK8中 ,经与野生型病毒 DNA共转染家蚕细胞后 ,通过体内同源重组的方式获得重组病毒 Bm NPV/ IGF-2。以 Bm NPV/ IGF-2感染 5龄家蚕幼虫 ,分别在感染后 2 4,48,72 ,96,10 8,12 0 h提取家蚕血淋巴液 ,以 ELISA法测定不同时象家蚕血中 IGF-2浓度 ,采用 Western-blot分析鉴定 IGF -2免疫学活性 ,MTT法观察其对 NIH3 T3细胞增殖的影响。结果 :ELISA测定显示 ,Bm NPV/ IGF-2感染家蚕幼虫 96h后 IGF-2表达率最高 ,每毫升血淋巴中约含 IGF-2 14 μg,Western-blot分析发现表达产物在蚕体内被加工成 7.0 k D成熟 h IGF-2 ,并对 NIH3 T3细胞具有良好促增殖效应 ,其促细胞生长能力明显优于来源于 E.coli的 IGF-2标准品。结论 :本研究实现具有免疫学活性及生物学活性的rh IGF-2在家蚕杆状病毒表达系统的高效表达

关 键 词:人胰岛素样生长因子-2  家蚕核型多角体病毒  基因表达  免疫学活性  生物学活性
文章编号:1000-5048(2002)02-0156-05
修稿时间:2001-10-29

Effective Expression of Human Insulin Like Growth Factor-2 in Bombyx Mori Larvae
DUAN Yu,WANG Cheng Y,ZHAO Hong,ZHANG Zhi Fang,CHEN Jia Wei,John S Sussenbach+ The No. Effective Expression of Human Insulin Like Growth Factor-2 in Bombyx Mori Larvae[J]. Journal of China Pharmaceutical University, 2002, 33(2): 78-82
Authors:DUAN Yu  WANG Cheng Y  ZHAO Hong  ZHANG Zhi Fang  CHEN Jia Wei  John S Sussenbach+ The No
Affiliation:DUAN Yu,WANG Cheng Y,ZHAO Hong,ZHANG Zhi Fang,CHEN Jia Wei,John S Sussenbach+ The No. Affiliated Hospital of Nanjing Medical University,Nanjing,+Zhenjiang Institute of Silkworm,Zhejiang,Chin,+Utrecht University,Am
Abstract:
Keywords:Recombinant human insulin like growth factor 2  Gene expression  Recombinant BmNPV  Biological activity
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