| 短发卡结构状RNA体外抑制呼吸道合胞病毒M2基因 mRNA水平和病毒蛋白表达的研究 |
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| 引用本文： | 崔玉霞,王莉佳,周娟,蒋利萍,杨锡强. 短发卡结构状RNA体外抑制呼吸道合胞病毒M2基因 mRNA水平和病毒蛋白表达的研究[J]. 实用儿科临床杂志, 2006, 21(16): 1050-1053 |
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| 作者姓名： | 崔玉霞 王莉佳 周娟 蒋利萍 杨锡强 |
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| 作者单位： | 1. 贵阳医学院附属医院儿科
2. 重庆医科大学附属儿童医院,免疫室,重庆,400014 |
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| 摘 要： | 目的观察针对人类呼吸道合胞病毒(RSV)M2基因mRNA构建的短发卡结构状RNA重组质粒在细胞水平对RSV复制的影响,为利用RNA干扰技术抑制RSV感染的研究奠定基础。方法将已成功构建的重组质粒pshRNA7816/8330转染HEp-2细胞,通过显微镜观察pshRNA7816/8330对RSV感染细胞病变(CPE)的抑制效率,利用四甲基偶氮唑盐比色实验检测pshRNA7816/8330的细胞毒性,经RT-PCR方法检测pshRNA7816对RSVM2mRNA表达的影响,免疫细胞化学染色法检测pshRNA7816对细胞内RSV蛋白的影响。结果pshRNA7816/8330对HEp-2细胞的正常生长没有明显的细胞毒性作用,2个重组质粒均能抑制RSV所致的CPE,但pshRNA7816对CPE抑制作用较pshRNA8330要强,RT-PCR和免疫细胞化学染色法结果显示pshRNA7816能明显降低RSVM2基因mRNA和RSV蛋白表达水平。结论针对RSVM2-1基因所构建的短发卡结构状RNA重组质粒pshRNA7816在细胞水平能有效抑制RSV的CPE形成降低RSVM2mRNA和病毒蛋白表达水平,从而干扰RSV的复制。
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| 关 键 词： | 短发卡结构状核糖核酸 呼吸道合胞病毒 基因 病毒复制 |
| 文章编号： | 1003-515X(2006)16-1050-04 |
| 收稿时间： | 2006-06-05 |
| 修稿时间： | 2006-06-05 |
Inhibition of Respiratory Syncytial Virus M2 Gene mRNA and Viral Protein Expresson by Short Hairpin RNA in vitro |
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| CUI Yu-xia,WANG Li-jia,ZHOU Juan,JIANG Li-ping,YANG Xi-qiang. Inhibition of Respiratory Syncytial Virus M2 Gene mRNA and Viral Protein Expresson by Short Hairpin RNA in vitro[J]. Journal of Applied Clinical Pediatrics, 2006, 21(16): 1050-1053 |
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| Authors: | CUI Yu-xia WANG Li-jia ZHOU Juan JIANG Li-ping YANG Xi-qiang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | short hairpin ribonucleic acid respiratory syncytial virus gene virus replication |
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