| 小鼠BPI_(36-259)抗菌蛋白在原核细胞中的表达及其抗血清的制备 |
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| 引用本文： | 冯颖,李丽,龙军,范宜强,刘振龙,孔庆利,吕喆,王炜,安云庆.小鼠BPI_(36-259)抗菌蛋白在原核细胞中的表达及其抗血清的制备[J].首都医学院学报,2008,29(2):184-189. |
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| 作者姓名： | 冯颖 李丽 龙军 范宜强 刘振龙 孔庆利 吕喆 王炜 安云庆 |
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| 作者单位： | 冯颖（首都医科大学基础医学院免疫学系）;李丽（首都医科大学基础医学院免疫学系）;龙军（首都医科大学基础医学院免疫学系）;范宜强（首都医科大学基础医学院免疫学系）;刘振龙（首都医科大学基础医学院免疫学系）;孔庆利（首都医科大学基础医学院免疫学系）;吕喆（首都医科大学基础医学院免疫学系）;王炜（首都医科大学基础医学院免疫学系）;安云庆（首都医科大学基础医学院免疫学系） |
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| 摘 要： | 目的采用原核表达系统获得小鼠BPI36-259目的抗菌蛋白,免疫家兔制备目的蛋白特异性抗血清。方法利用生物信息学方法预测小鼠BPI功能片段,构建pUC57-muBPI1-281质粒;PCR扩增获得mu BPI36-259基因片段,构建pET28a-mu BPI36-259重组质粒;用IPTG诱导重组质粒转化的E.coli BL21(DE3)感受态细胞,获得以包涵体形式表达为主的mu BPI36-259目的蛋白;用变性目的蛋白免疫家兔获得兔抗鼠BPI36-259蛋白特异性抗血清;用间接ELISA法检测血清抗体特异性及其效价。结果成功构建了pET28a-mu BPI36-259重组质粒,转化E.coli BL21(DE3)获得以包涵体表达形式为主的目的蛋白;用变性目的蛋白免疫家兔获得小鼠BPI36-259蛋白特异性抗血清(效价1∶10000)。结论在原核细胞中成功获得了以包涵体表达形式为主的抗菌蛋白,免疫家兔获得的特异性抗血清可用于小鼠BPI36-259目的抗菌蛋白的检测。
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| 关 键 词： | 小鼠BPI36-259目的蛋白 E.coli BL21(DE3) 多克隆抗血清 |
| 收稿时间： | 2008-01-01 |
| 修稿时间： | 2008年1月1日 |
Expression of muBPI_(36-259) Recombinant Protein Prokaryotic Expression Vector and Preparation of a Polyclonal Antiserum Against muBPI_(36-259) Product |
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| Feng Ying,Li Li,Long Jun,Fan Yiqiang,Liu Zhenlong,Kong Qingli,Wang Wei,An Yunqing.Expression of muBPI_(36-259) Recombinant Protein Prokaryotic Expression Vector and Preparation of a Polyclonal Antiserum Against muBPI_(36-259) Product[J].Journal of Capital University of Medical Sciences,2008,29(2):184-189. |
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| Authors: | Feng Ying Li Li Long Jun Fan Yiqiang Liu Zhenlong Kong Qingli Wang Wei An Yunqing |
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| Institution: | Department of Immunology;School of Basic Medical Sciences;Capital Medical University |
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| Abstract: | Objective To make murine BPI36-259 protein with prokaryotic expressing system and prepare rabbit polyclonal antiserum with the recombinant protein. Methods Functional domain of murine BPI was predicted by bioinformatics methods. cDNA of muBPI1-281 was synthesized and cloned to pUC57 cloning vector to generate pUC57-muBPI1-281 construct. Then muBPI36-259 functional fragment was amplified on the pUC57-muBPI1-281 plasmid by PCR and cloned into prokaryotic expression vector, pET28a, to produce the expression ve... |
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| Keywords: | muBPI36-259 recombinant protein" target="_blank">36-259 recombinant protein')" href="#">muBPI36-259 recombinant protein E coli BL21(DE3) polyclonal antiserum |
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