内皮素3对恶性黑素瘤A375细胞上皮基质转化的影响

目的 研究内皮素-3（ET-3）对人恶性黑素瘤（MM）A375细胞上皮基质转化（EMT）的影响。方法 体外培养A375细胞，分别设立3组：空白对照组、100 nmol/L ET-3组、100 nmol/L ET-3和100 μmol/L BQ788（内皮素受体B阻断剂）组。采用Transwell小室检测细胞转移，细胞爬片技术检测细胞形态变化，实时PCR和Western印迹检测上皮基质转化相关分子上皮细胞钙黏蛋白、波形蛋白及转录因子（Twist、 Slug）表达情况，使用方差分析及Scheffe法对结果进行分析。结果 各干预条件中，与空白对照组比较，ET-3可以促进A375细胞的转移，BQ788可阻断该效应（3组穿膜细胞数分别为4.200 ± 0.837、9.400 ± 0.548、3.400 ± 0.894，F = 88.44，P < 0.01）；ET-3 可以促进A375细胞由上皮型向成纤维细胞样形态转变，促进A375上皮细胞钙黏蛋白表达下调（3组分别为0.330 ± 0.002、0.280 ± 0.007、0.420 ± 0.008，F = 329.98，P < 0.01），波形蛋白表达上调（0.830 ± 0.014、1.160 ± 0.003、0.750 ± 0.030，F = 262.94，P < 0.01），而BQ788可阻断这种效应。ET-3可以促进上皮基质转化相关转录因子Slug mRNA（F = 376.94，P < 0.01）及Twist mRNA（F = 215.62，P < 0.01）及其蛋白水平（FSlug = 288.87，P < 0.01；FTwist = 156.96，P < 0.05）上的表达上调。结论 ET-3/ETRB通过上调波形蛋白，下调上皮细胞钙黏蛋白的表达，并上调转录因子（Twist、 Slug）的表达，促进黑素瘤A375细胞上皮基质转化。

Effects of endothelin-3 on epithelial-to-mesenchymal transition in a malignant melanoma cell line A375