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| 血管内皮生长因子165真核基因转染载体转染的骨骼肌细胞 | |
| 引用本文： | 董 刚,郑建金,李 涛,徐 欣,卢恕来,吴 鸿. 血管内皮生长因子165真核基因转染载体转染的骨骼肌细胞[J]. 中国组织工程研究, 2012, 16(37): 6897-6901. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2012.37.012 |
| 作者姓名： | 董 刚 郑建金 李 涛 徐 欣 卢恕来 吴 鸿 |
| 作者单位： | 1山东大学口腔医学院，山东省济南市 2500122青岛市市立医院，山东省青岛市 266011 |
| 摘 要： | 背景：血管内皮生长因子基因转染治疗组织损伤的研究倍受关注，构建稳定可靠的人血管内皮生长因子真核表达载体有重要意义。目的：克隆人血管内皮生长因子基因血管内皮生长因子165片段，构建pcDNA4-HisMax-C/VEGF165真核表达质粒，并验证其转染大鼠骨骼肌细胞的可靠性。方法：采用反转录-聚合酶链反应技术，从人卵巢癌患者外周血中提取并扩增出血管内皮生长因子165基因片段，通过DNA重组技术将该基因片段重组于pcDNA4-HisMax-C真核表达载体上，构建成pcDNA4-HisMax-C/VEGF165重组质粒，聚合酶链反应扩增，分别用酶切电泳分析和DNA测序的方法对提取和重组DNA 进行鉴定。pcDNA4-HisMax-C/VEGF165重组质粒转染骨骼肌细胞1周后反转录-聚合酶链反应提取血管内皮生长因子基因并酶切电泳鉴定。结果与结论：构建的重组质粒目的基因片段为人血管内皮生长因子165 cDNA，对大鼠骨骼肌细胞转染后检测到血管内皮生长因子165基因片段。提示成功地克隆了血管内皮生长因子165基因并构建了其真核表达质粒，能以此为载体转染至骨骼肌细胞，并已整合到骨骼肌的基因组参与转录，证明了其转染的有效性。 |
| 关 键 词： | 血管内皮生长因子 真核表达载体 基因克隆 基因扩增 基因转染 |
| 收稿时间： | 2012-01-05 |
Construction of vascular endothelial growth factor 165 gene eukaryotic vectors for transfection of skeletal muscle cells |
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| Dong Gang,Zheng Jian-jin,Li Tao,Xu Xin,Lu Shu-lai,Wu Hong. Construction of vascular endothelial growth factor 165 gene eukaryotic vectors for transfection of skeletal muscle cells[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2012, 16(37): 6897-6901. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2012.37.012 | |
| Authors: | Dong Gang Zheng Jian-jin Li Tao Xu Xin Lu Shu-lai Wu Hong |
| Affiliation: | 1Stomatology School, Shandong University, Jinan 250012, Shandong Province, China 2Qingdao Municipal Hospital, Qingdao 266011, Shandong Province, China |
| Abstract: | |
| Keywords: | |
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