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日本血吸虫新基因——腺苷酸激酶基因的发现与克隆
引用本文:彭鸿娟,陈晓光,卢晓昭,龙綮新. 日本血吸虫新基因——腺苷酸激酶基因的发现与克隆[J]. 南方医科大学学报, 2002, 22(8): 693-696
作者姓名:彭鸿娟  陈晓光  卢晓昭  龙綮新
作者单位:第一军医大学寄生虫学教研室,广东,广州,510515;第一军医大学学员一旅五队,广东,广州,510515
基金项目:联合国发展开发署/世界银行/世界卫生组织热带病研究和培训特别规划署基金(A00690,A00191)
摘    要:目的将用表达序列标签(expression sequence tag, EST)策略及同源性搜索发现的日本血吸虫新基因——腺苷酸激酶(adenylate kinase,AK)cDNA克隆到表达质粒pET32a(+)上,为下一步研究该基因的功能做准备。方法将插入于pTriplEx2 质粒上的cDNA进行测序,用BLASTn程序搜索测序结果,根据表达质粒pET32a(+)上的克隆位点及该cDNA序列设计PCR引物,将PCR产物纯化后连接到pMD 18-T载体上,将重组T载体经EcoRⅠ/XhoⅠ双酶切后切下的SjAK基因导入原核可溶性表达质粒pET32a(+)中。结果本研究所发现的新基因与曼氏血吸虫AK基因的同一性达86%,PCR产物的片段长度与预期大小一致,重组T载体及表达质粒经EcoR I及XhoI双酶切后证明具有与目标片段长度相符的插入片段。结论发现日本血吸虫的cDNA与曼氏血吸虫AK cDNA高度同源,并且成功地构建出重组表达质粒pET32a(+)-SjAK。

关 键 词:日本血吸虫  曼氏血吸虫  腺苷酸激酶
文章编号:1000-2588(2002)08-0693-04
修稿时间:2002-02-09

Identification and cloning of adenylate kinase gene, a novel gene of Schistosomajaponicum
PENG Hong-juan ,CHEN Xiao-guang ,LU Xiao-zhao ,LONG Qing-xin. Identification and cloning of adenylate kinase gene, a novel gene of Schistosomajaponicum[J]. Journal of Southern Medical University, 2002, 22(8): 693-696
Authors:PENG Hong-juan   CHEN Xiao-guang   LU Xiao-zhao   LONG Qing-xin
Affiliation:PENG Hong-juan 1,CHEN Xiao-guang 2,LU Xiao-zhao 3,LONG Qing-xin 11 Department of Parasitology,First Military Medical University,Guangzhou 510515,China, 2 Fifth Corps,First Cadet Brigade,First Military Medical University,Guangzhou 510515,Chi
Abstract:
Keywords:Schistosoma japonicum  Schistosoma mansoni  adenylate kinase
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