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基于PCR反向斑点杂交技术的32型生殖道人乳头瘤病毒基因分型方法的建立
引用本文:黄学文,赵琪,赵兰静,朱菊平,吴玉梅,潘杰.基于PCR反向斑点杂交技术的32型生殖道人乳头瘤病毒基因分型方法的建立[J].临床检验杂志,2015(9):648-652.
作者姓名:黄学文  赵琪  赵兰静  朱菊平  吴玉梅  潘杰
作者单位:华东疗养院检验科,江苏无锡 214065;南京医科大学附属无锡人民医院检验科,江苏无锡 214023;华东疗养院检验科,江苏无锡 214065;华东疗养院检验科,江苏无锡 214065;华东疗养院检验科,江苏无锡 214065;华东疗养院检验科,江苏无锡 214065
基金项目:上海市卫生和计划生育委员会重点项目(201440020)。
摘    要:目的建立基于PCR反向斑点杂交技术(PCR-RDB)的32型生殖道人乳头瘤病毒(HPV)基因分型方法。方法设计并合成基于MY09/11的HPV型特异性引物和探针;以HPV载体和临床样本为模板,用自建的PCR-RDB法对300例临床宫颈脱落细胞进行HPV分型检测,并与商品化的PCR-RDB法检测结果进行比较。结果自建的PCR-RDB法的特异性、准确性和重复性良好,其对39和51型HPV的最低检测限为50拷贝/反应,其余各型别HPV最低检测限为5拷贝/反应。用自建的PCR-RDB法对300例临床样本进行HPV分型的总阳性率、单一感染率和多重感染率分别为18.67%(56/300)、12.33%(37/300)、6.33%(19/300),与商品化试剂的检测结果均无统计学意义(χ2分别为0.744,0.597和0.118,P均0.05)。两法一致性检验的Kappa值为0.889(P0.01)。结论成功建立了灵敏度、特异性高,重复性良好,适合临床上对32型HPV分型的PCR-RDB法。

关 键 词:聚合酶链反应  反向斑点杂交  人乳头瘤病毒  基因分型
收稿时间:2015/7/28 0:00:00

Establishment of a genotyping method for the detection of 32 types of genital tract human papillomaviruses based on a PCR reverse dot blot array
Abstract:
Keywords:polymerase chain reaction  reverse dot blot  human papillomavirus  genotyping
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