| 小鼠胚胎干细胞Notch1基因沉默对糖原合酶激酶3β和周期蛋白依赖性激酶5表达的影响 |
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| 引用本文： | 张秋莹,段萍,韩雪飞,许燕,邢莹,鄢文海.小鼠胚胎干细胞Notch1基因沉默对糖原合酶激酶3β和周期蛋白依赖性激酶5表达的影响[J].中国神经再生研究,2010,14(27):4993-4996. |
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| 作者姓名： | 张秋莹 段萍 韩雪飞 许燕 邢莹 鄢文海 |
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| 作者单位： | 郑州大学医学院干细胞研究中心，河南省郑州市 450052;郑州澍青医学高等专科学校，河南省郑州市 450064,郑州大学医学院干细胞研究中心，河南省郑州市 450052,郑州大学医学院干细胞研究中心，河南省郑州市 450052,郑州大学医学院干细胞研究中心，河南省郑州市 450052,郑州大学医学院干细胞研究中心，河南省郑州市 450052,郑州大学医学院干细胞研究中心，河南省郑州市 450052 |
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| 基金项目： | 河南省杰出青年基金资助(94100510025) |
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| 摘 要： | 背景：GSK-3β与CDK-5都属于磷酸化蛋白激酶，一并参与胚胎神经细胞分化发育具体机制尚不清楚。
目的：观察胚胎干细胞Notch1基因沉默后Hes-1、PS1、Gsk-3β和Cdk5表达的变化以及Notch信号对Gsk-3β和Cdk5表达的调节作用及对早期神经细胞分化发育的潜在影响。
方法：通过阳离子脂质体转染法将Notch1 siRNA真核表达载体转入小鼠胚胎干细胞。倒置显微镜下观察转染前后细胞的形态变化；48 h后收集细胞，RT-PCR检测包括Notch1在内的Hes-1、PS1、Gsk-3β和Cdk5基因水平表达情况，单因素方差分析各组间差异。
结果与结论：①RT-PCR检测到转染pSINsi-U6-Notch1质粒组胚胎干细胞Notch1、Hes-1、GSK-3β和Cdk5的表达情况较转染空质粒组与正常对照组显著降低(P < 0.05)，转染空质粒组与正常对照组之间无明显差异(P > 0.05, n=5)。②倒置显微镜下观察未见外源质粒的转入对胚胎干细胞克隆性生长的影响，只是转染pSINsi-U6-Notch1质粒组胚胎干细胞的增殖量较其他两组有所降低。③胚胎干细胞PS1表达情况3组间无显著差异(P > 0.05)。可以看出，胚胎干细胞Notch1基因表达水平的降低导致蛋白激酶GSK-3β、Cdk5表达的下调。
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| 关 键 词： | 胚胎干细胞 siRNA 转染 Notch信号途径 Gsk-3β Cdk5 |
| 修稿时间： | 4/9/2010 12:00:00 AM |
Effects of Notch1 gene silencing in mouse embryonic stem cells on glycogen synthase kinase-3 beta and cyclin-dependent kinase 5 expression |
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| Zhang Qiu-ying,Duan Ping,Han Xue-fei,Xu Yan,Xing Ying and Yan Wen-hai.Effects of Notch1 gene silencing in mouse embryonic stem cells on glycogen synthase kinase-3 beta and cyclin-dependent kinase 5 expression[J].Neural Regeneration Research,2010,14(27):4993-4996. |
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| Authors: | Zhang Qiu-ying Duan Ping Han Xue-fei Xu Yan Xing Ying and Yan Wen-hai |
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| Institution: | Stem Cell Research Center, Medical College, Zhengzhou University, Zhengzhou 450052, Henan Province, China;Zhengzhou Shuqing Medical School, Zhengzhou 450064, Henan Province, China,Stem Cell Research Center, Medical College, Zhengzhou University, Zhengzhou 450052, Henan Province, China,Stem Cell Research Center, Medical College, Zhengzhou University, Zhengzhou 450052, Henan Province, China,Stem Cell Research Center, Medical College, Zhengzhou University, Zhengzhou 450052, Henan Province, China,Stem Cell Research Center, Medical College, Zhengzhou University, Zhengzhou 450052, Henan Province, China,Stem Cell Research Center, Medical College, Zhengzhou University, Zhengzhou 450052, Henan Province, China |
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