miRNA-193a-3p靶向TGF-β2基因诱导肝癌细胞凋亡的分子机制研究

目的：探讨微小RNA（microRNA，miRNA）-193a-3p在肝癌组织中的表达及其对肝癌细胞迁移及凋亡的影响和潜在分子机制。方法：利用实时荧光定量PCR（real-time quantitative PCR，qRT-PCR）检测miR-193a-3p在肝癌及其癌旁正常组织中的表达；将miR-193a-3p mimic转染肝癌HepG2细胞系（NC为对照组），利用CCK-8（Cell Counting Kit-8）实验、Transwell实验以及流式细胞仪评估HepG2细胞的活性、迁移及凋亡情况；利用生物信息学分析、qRT-PCR及双荧光素酶报告实验确证miR-193a-3p对下游靶标转化生长因子（transforming growth factor，TGF）-β2的影响；在miR-193a-3p过表达的HepG2细胞中转染TGF-β2质粒，检测过表达TGF-β2对miR-193a-3p诱导HepG2细胞活性、迁移及凋亡的影响。结果：miR-193a-3p在肝癌组织中的表达显著低于正常肝脏组织，差异具有统计学意义（P< 0.01）；与NC组比较，miR-193a-3p组细胞的增殖活性及迁移数量减少，细胞凋亡率显著增加，差异有统计学意义（分别为：t = 6.11，8.90，11.53，均P< 0.05），且以时间依赖性方式诱导HepG2细胞凋亡；miR-193a-3p与靶基因TGF-β2的互补结合序列在进化上高度保守，TGF-β2是miR-193a-3p的下游靶标；与miR-193a-3p+ 空质粒组比较，miR-193a-3p+ TGF-β2组肝癌细胞的增殖活性及迁移数量增多，细胞凋亡率显著减少，差异有统计学意义（分别为：t = 3.43，2.88，9.32，均P< 0.05）。结论：miR-193a-3p在肝癌组织中表达减少，miR-193a-3p通过靶向调控TGF-β2基因抑制HepG2细胞的活性和迁移，促进HepG2细胞的凋亡。