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pSiRNA-Notch1逆转录病毒载体的构建及对恶性脑胶质瘤细胞的作用
引用本文:尹昌林,吕胜青,黄轶,李光辉,唐莉,杨辉. pSiRNA-Notch1逆转录病毒载体的构建及对恶性脑胶质瘤细胞的作用[J]. 第三军医大学学报, 2007, 29(12): 1211-1214
作者姓名:尹昌林  吕胜青  黄轶  李光辉  唐莉  杨辉
作者单位:第三军医大学新桥医院神经外科,重庆,400037;第三军医大学重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室,重庆,400016;第三军医大学新桥医院全军肿瘤诊治中心,重庆市肿瘤生物技术研究所,重庆,400037;第三军医大学西南医院乳腺疾病中心,重庆,400038
摘    要:目的 建立逆转录病毒介导的人Notch1基因RNA干扰体外表达体系并观察对恶性脑胶质瘤细胞的作用.方法 将人Notch1基因RNAi双链转录DNA片段重组到逆转录病毒质粒Psilencer 5.1-H1 Retro中,构建成携带人Notch1基因RNAi逆转录病毒载体pSiRNA-Notch1,经PT6细胞包装后,产生的重组逆转录病毒感染U251和CHG-5恶性脑胶质瘤细胞,用WST-8、RT-PCR和Western blot分别检测对转染细胞活性、人Notch1 mRNA和蛋白表达的影响.结果 重组pSiRNA-Notch1质粒经测序鉴定正确.重组逆转录病毒滴度可达224×10 4cfu/ml,感染U251和CHG-5恶细胞后3 d能明显抑制细胞生长,RT-PCR和Western blot检测人Notch1 mRNA和蛋白表达水平明显低于阴性对照组和未干扰组.结论 携带人Notch1基因RNAi双链转录DNA片段的逆转录病毒有明显的抑制恶性脑胶质瘤细胞生长作用,为下一步开展基因治疗恶性脑胶质瘤奠定了基础.

关 键 词:pSiRNA-Notch1逆转录病毒载体  恶性脑胶质瘤  基因治疗
文章编号:1000-5404(2007)12-1211-04
修稿时间:2007-03-02

Construction of pSiRNA-Notch1 recombinant retroviral vector and its effect on malignant glioma cells in vitro
YIN Chang-lin,LU Sheng-qing,HUANG Yi,LI Guang-hui,TANG Li,YANG Hui. Construction of pSiRNA-Notch1 recombinant retroviral vector and its effect on malignant glioma cells in vitro[J]. Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae, 2007, 29(12): 1211-1214
Authors:YIN Chang-lin  LU Sheng-qing  HUANG Yi  LI Guang-hui  TANG Li  YANG Hui
Affiliation:1 Department of Neurosurgery, 3Institute for Cancer Research, Xinqiao Hospital, Chongqing 400037; 4Breast Disease Center, Southwest Hospital, Third Military Medical University Chongqing 400038; 2Department of Biochemistry and Molecular Biology, Chongqing Medical University, Chongqing 400010, China
Abstract:
Keywords:pSiRNA-Notch1 retroviral vector  malignant glioma  gene therapy
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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