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结核杆菌Pup-蛋白酶体系统与结核杆菌持留性的相关性研究
引用本文:朱彬,雷英,吴芳,张辉,张春军,章乐,吴江东,曹旭东,邬博,何丽,张玉清,李瑞山,王钊,张万江.结核杆菌Pup-蛋白酶体系统与结核杆菌持留性的相关性研究[J].中国免疫学杂志,2015(4):447-452.
作者姓名:朱彬  雷英  吴芳  张辉  张春军  章乐  吴江东  曹旭东  邬博  何丽  张玉清  李瑞山  王钊  张万江
作者单位:石河子大学医学院病原生物学教研室;石河子大学《新疆地方与民族高发病》教育部重点实验室;石河子市人民医院老年病一科
基金项目:国家自然科学基金资助项目(No.81260261,81160192);新疆生产建设兵团医药专项资金资助项目(No.2012BA022);石河子大学高层次人才科研启动项目(No.RCZX201446)
摘    要:目的:本研究通过诱导结核杆菌在低氧环境中进入持留状态,比较分析不同时间点、不同环境下结核杆菌Pup、Dop、Paf A和Mpa基因的表达水平差异,探讨研究Pup-蛋白酶体系统对结核杆菌持留性的调控作用。方法:本实验以结核杆菌国际标准强毒株H37Rv菌株(以下简称为H37Rv菌株)为研究对象,在低氧、有氧环境下进行培养,分别提取不同时间点每组样本菌株的总RNA,并进行纯度鉴定。运用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR的方法,分别检测各组结核杆菌菌株的Pup、Dop、Paf A和Mpa基因的表达;比较分析不同时间点、不同环境下的各结核杆菌菌株Pup、Dop、Paf A和Mpa基因的表达水平差异。结果:在不同时间点对低氧环境下菌株Pup、Dop、Paf A和Mpa的表达水平进行检测,Pup、Dop、Paf A和Mpa基因的相对表达水平:低氧环境下,与0 d比较,Pup基因在4 d、7 d、10 d分别上调1.66、2.43、2.76倍,Dop基因在2 d、4 d、7 d、10 d分别上调1.38、1.91、2.54、3.28倍,Paf A基因在2 d、4 d、7 d、10 d分别上调1.22、1.75、2.37、2.67倍,Mpa基因在4 d、7 d、10 d分别上调1.66、2.21、2.63倍(P<0.05);以有氧环境组做对照,低氧环境下,相同时间点,Pup基因在4 d、7 d、10 d分别上调1.85、2.81、2.93倍,Dop基因在2 d、4 d、7 d、10 d分别上调1.20、1.76、2.01、3.01倍,Paf A基因在2 d、4 d、7 d、10 d分别上调1.22、1.57、2.29、2.29倍,Mpa基因在2 d、4 d、7 d、10 d分别上调1.16、1.58、2.16、2.69倍(P<0.05)。结论:低氧环境下,不同时间点,Pup、Dop、Paf A和Mpa基因的相对表达量存在差异;以有氧环境组作对照,相同时间点,低氧环境下与有氧环境下Pup、Dop、Paf A和Mpa基因的相对表达量也存在差异。Pup-蛋白酶体系统对结核杆菌持留性具有一定的调控作用。

关 键 词:结核杆菌  Pup-蛋白酶体系统  持留性
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