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pmRNA IRES-hKDR(Ig1-3)重组质粒的构建、表达及鉴定
引用本文:孙林英,刘畅,胡锋涛,刘秀丽,邵晓婷,刘端祺,谭晓华.pmRNA IRES-hKDR(Ig1-3)重组质粒的构建、表达及鉴定[J].华北国防医药,2008,20(4).
作者姓名:孙林英  刘畅  胡锋涛  刘秀丽  邵晓婷  刘端祺  谭晓华
作者单位:[1]泰山医学院医学检验系,山东泰安271016 [2]北京军区总医院肿瘤诊疗中心,北京100700 [3]北京军区总医院血液科,北京100700 [4]滕州市级索中心卫生院,山东滕州277500
基金项目:国家自然科学基金,北京市自然科学基金
摘    要:目的:利用基因工程技术构建pmRNA IRES—hKDR(Ig1-3)重组质粒,为其应用于肿瘤的基因治疗奠定基础。方法:以本实验室构建保存的pcDNA3.1hKDR为模板,PCR扩增hKDR(Ig1-3)eDNA片段后用Nco Ⅰ和XhoⅠ酶切后插入pmRNA IRES多克隆位点的相应位点中,经PCR、酶切和测序鉴定其序列正确性,然后用试剂盒体外转录出相应的mRNA,用脂质体转染COS-7细胞,经G418筛选后通过免疫组化和Western blot检测该融合蛋白。结果:PCR、酶切和测序证实pmRNAIRES—hKDR(Ig1-3)构建成功,体外转录出相应的mRNA,免疫组化和Western blot检测出其蛋白表达。结论:成功构建含pmRNAIRES—hKDR(Ig1-3)的真核表达重组质粒,有助于进一步研究其抗肿瘤作用。

关 键 词:受体  血管内皮生长因子  质粒  基因表达调控

Construction,Expression and Identification of Recombinant Plasmid with pmRNA IRES-hKDR(Ig1-3)
SUN Lin-ying,LIU Changa,HU Feng-tao,LIU Xiu-lib,SHAO Xiao-tingb,LIU Duan-qia,TAN Xiao-huab.Construction,Expression and Identification of Recombinant Plasmid with pmRNA IRES-hKDR(Ig1-3)[J].Medical Journal of Beijing Military Region,2008,20(4).
Authors:SUN Lin-ying  LIU Changa  HU Feng-tao  LIU Xiu-lib  SHAO Xiao-tingb  LIU Duan-qia  TAN Xiao-huab
Institution:SUN Lin-ying1,LIU Chang2a,HU Feng-tao3,LIU Xiu-li2b,SHAO Xiao-ting2b,LIU Duan-qi2a,TAN Xiao-hua2b(1.The Clinical Laboratory of Taishan Medical College,Taian,Sh,ong 271016,China,2.a.Department of Oncology,b.Department of Hematology,General Hospital of Beijing Military Area Comm,,Beijing 100700,3.Jisuo Central Hospital of Tengzhou,Tengzhou,Sh,ong 277500,China)
Abstract:
Keywords:Receptor  vascular endothelial growth factor  Plasmid  Genetic expression regulation  
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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