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改良酶消化法在人脑胶质瘤细胞快速原代培养中的应用
引用本文:向伟,漆松涛,刘亚伟,雷炳喜,周强,易国仲,陈子阳,严乐. 改良酶消化法在人脑胶质瘤细胞快速原代培养中的应用[J]. 解放军医学杂志, 2016, 0(6): 461-465. DOI: 10.11855/j.issn.0577-7402.2016.06.06
作者姓名:向伟  漆松涛  刘亚伟  雷炳喜  周强  易国仲  陈子阳  严乐
作者单位:510515广州,南方医科大学南方医院神经外科
基金项目:国家自然科学基金(81372692;81572498),教育部博士点基金(20134433120014)This work was supported by the National Natural Science Foundation (81372692
摘    要:
目的 建立一种人脑胶质瘤细胞原代培养的改良酶消化法.方法 基于文献并结合实际工作中经验,改良既往文献报道的酶消化法,对32例不同级别的胶质瘤进行消化后行原代细胞培养,通过倒置相差显微镜观察肿瘤细胞的形态学特点,传代时采用差速贴壁法对原代细胞进行纯化.采用细胞免疫荧光法对原代细胞进行鉴定,通过细胞增殖实验(CCK-8法)绘制生长曲线,研究体外培养细胞的增殖情况.结果 采用改良的酶消化法成功培养28例,失败4例,成功率为87.5%.培养成功的细胞贴壁生长,细胞状态稳定,形态各异,生长状态良好,并可传代.细胞免疫荧光检测显示胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达阳性,证明培养的细胞为胶质瘤细胞;细胞增殖实验显示细胞在体外增殖活跃,肿瘤病理级别越高,细胞增殖能力越强.结论 改良的酶消化法用于人脑胶质瘤细胞原代培养具有简单、高效、成功率高等优点.

关 键 词:神经胶质瘤  原代细胞培养  酶消化法

Application of modified enzyme digestion method in rapid primary culture of human glioma cells
Abstract:
Keywords:glioma  primary cell culture  enzymatic digestion method
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