摘 要: | 目的利用竞争PCR法建立分级测定HBVDNA含量的定量方法.方法设立3个标准竞争模板(102cop,104cop,106cop),分别和恒量的待测模板混合,分别进行40,30,20次循环的PCR扩增,最后凝胶电泳分离待测模板和竞争模板的PCR产物,测定两者的荧光强度的比值,计算待测模板的初始量.结果对乙型肝炎血清HBVDNA定量表明,12份HBeAg阳性血清,HBVDNA的血清浓度在6×107~1×1011cop/L,而12份HBeAb阳性血清只有7份可检出HBVDNA,它们的血清浓度均在3×108cop/L以下,其余5份用该PCR方法,检测不到.结论该方法可用于HBVDNA以及其他病原体DNA的定量
|