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新生大鼠螺旋神经节细胞体外生长特点及脂质体介导的转染效率
引用本文:陈请国,褚汉启,王显红,陈金,李建玲,周良强,熊浩,王燕,李志勇,崔永华. 新生大鼠螺旋神经节细胞体外生长特点及脂质体介导的转染效率[J]. 听力学及言语疾病杂志, 2010, 18(5). DOI: 10.3969/j.issn.1006-7299.2010.05.016
作者姓名:陈请国  褚汉启  王显红  陈金  李建玲  周良强  熊浩  王燕  李志勇  崔永华
作者单位:1. 华中科技大学同济医学院附属同济医院耳鼻咽喉-头颈外科,武汉,430030
2. 咸宁学院附属第一医院耳鼻咽喉科
基金项目:国家自然科学基金资助项目 
摘    要:
目的 探讨螺旋神经节细胞(spiral ganglion cells,SGCs)体外生长规律及特点,并观察阳离子脂质体转染SGCs的情况.方法 从出生3~4 d的SD大鼠耳蜗中分离螺旋神经节组织,消化后放在含10%胎牛血清的DMEM/F12中培养.第2 d换用含2%B27及5ìmol/L阿糖胞苷的Neurobasal培养基纯化SGCs,取第4 d活性良好的细胞爬片后,通过免疫荧光法用NF-200抗体鉴定SGCs;另外用质粒pEGFP-C2联合Lipofectamine 2000转染SGCs,观察其转染效率及对细胞活性的影响.结果 体外培养的SGCs胞体饱满透亮,折光性好,一般能存活2周左右,第3~7 d活性最好.细胞对NF-200染色阳性;约10%的SGCs能被Lipofectamine 2000转染,但小部分细胞轴突缩短,甚至漂浮起来.结论 含B27的Neurobasal培养基能培养出活性良好的SGCs;脂质体和质粒pEGFP-C2能成功地转染SGCs,但转染效率较低,并在一定程度上影响细胞的活性.

关 键 词:螺旋神经节细胞  转染

The Growth Characteristic of Spiral Ganglion Cells from Newborn Rats and the Liposome-mediated EGFP Transfection Efficiency in Vitro
Chen Qingguo,Chu Hanqi,Wang Xianhong,Chen Jin,Li Jianling,Zhou Liangqiang,Xiong Hao,Wang Yan,Li Zhiyong,Cui Yonghua. The Growth Characteristic of Spiral Ganglion Cells from Newborn Rats and the Liposome-mediated EGFP Transfection Efficiency in Vitro[J]. Journal of Audiology and Speech Pathology, 2010, 18(5). DOI: 10.3969/j.issn.1006-7299.2010.05.016
Authors:Chen Qingguo  Chu Hanqi  Wang Xianhong  Chen Jin  Li Jianling  Zhou Liangqiang  Xiong Hao  Wang Yan  Li Zhiyong  Cui Yonghua
Abstract:
Keywords:Lipofectamine 2000  B27
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