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| 携带HGF基因的重组腺病毒表达载体的构建 | |
| 引用本文： | 刘薇薇,陈娟,刘移民,李素梅,余卫,陈嘉榆,张成,陈运贤,林琛莅,钟雪云. 携带HGF基因的重组腺病毒表达载体的构建[J]. 广东医学, 2010, 31(13) |
| 作者姓名： | 刘薇薇 陈娟 刘移民 李素梅 余卫 陈嘉榆 张成 陈运贤 林琛莅 钟雪云 |
| 作者单位： | 1. 广东省广州市第十二人民医院,510620 2. 暨南大学医学院病理学教研室,广州,510632 3. 中山大学附属第一医院血液科,广州,510080 |
| 基金项目： | 广州市医药卫生科技项目 |
| 摘 要： | 目的 构建携带肝细胞生长因子HGF的重组腺病毒表达载体。为研究HGF的功能、作用机制及临床应用奠定基础。方法 以pcDNA3.0-HGF为模板，经PCR扩增得到HGF基因，将其插入到带有绿色荧光蛋白基因的穿梭载体pAdTrack-CMV-GFP中，得到重组质粒pAdTrack-CMV-HGF-GFP。将线性化的pAdTrack-CMV-HGF-GFP与pAdEasy-1质粒共转化BJ5183感受态细胞，进行同源重组，得到重组腺病毒质粒，经PacI线性化后，转染AD293细胞。结果 得到重组腺病毒，转染重组腺病毒DNA的AD293细胞经荧光显微镜能观察到AD293细胞内有绿色荧光，且出现细胞病变反应（cytopathic effects，CPE)，对传代的Ad-HGF进行PCR分析证实得到目的基因,感染CHL细胞，通过western blotting分析HGF蛋白表达量，从而证实重组腺病毒载体构建成功。结论 腺病毒制备简便，成本低，周期短，毒性小，产量高，感染率及蛋白表达率高，成功构建Ad-HGF为进一步研究HGF并最终使其在临床应用中更为方便提供实验基础。 |
| 关 键 词： | 重组腺病毒 肝细胞生长因子 基因治疗 |
Construction of recombinant adenovirus vector carrying HGF gene |
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| Abstract: | |
| Keywords: | |
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