| 实时荧光定量PCR快速检测百日咳鲍特菌方法学建立及评价 |
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| 引用本文： | 王慧,罗炜,赖克方. 实时荧光定量PCR快速检测百日咳鲍特菌方法学建立及评价[J]. 临床检验杂志, 2010, 28(6): 407-409 |
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| 作者姓名： | 王慧 罗炜 赖克方 |
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| 作者单位： | 广州医学院第一附属医院检验科， 广州510120;广州医学院第一附属医院呼吸疾病国家重点实验室，广州510120;广州医学院第一附属医院呼吸疾病国家重点实验室，广州510120 |
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| 基金项目： | 广州市科技攻关重点项目基金（2002Z2E0091）；广东省科技计划项目基金（2010B031600145）。 |
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| 摘 要： | ![]()
目的 建立实时荧光定量PCR检测百日咳鲍特菌的方法。 方法 以百日咳鲍特菌的重复插入序列IS481为目的基因，设计探针和引物, 以克隆的IS481基因片段为DNA模板，在荧光定量PCR仪上建立实时荧光定量PCR检测方法和标准曲线，并进行灵敏度、重复性、特异性实验。 结果 建立的定量标准曲线阈值循环数（Ct）与模板拷贝数呈良好线性关系(r=0.998)；最低检测浓度为102 copies/μl；批内及批间变异系数均小于4%；对临床其他常见呼吸道病原体不出现特异性扩增曲线。 结论 实时荧光定量PCR法检测IS481基因可用于百日咳鲍特菌的快速检测，具有较好的灵敏度、特异性及重复性。
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| 关 键 词： | 百日咳鲍特菌；聚合酶链反应；实时荧光定量；IS481基因 |
| 收稿时间： | 2009-08-27 |
| 修稿时间： | 2010-09-08 |
Development and evaluation of real time quantitative PCR assay for rapidly detecting Bordetella pertussis |
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| Abstract: | ![]()
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| Keywords: | Bordetella pertussis polymerase chain reaction assay real-time fluorescent quantification IS481 gene |
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