| 应用引物原位标记技术快速检测SOX2基因 |
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| 引用本文： | 罗熙,丁显平,陈林,权强.应用引物原位标记技术快速检测SOX2基因[J].中华医学遗传学杂志,2012,29(3):289-292. |
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| 作者姓名： | 罗熙 丁显平 陈林 权强 |
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| 作者单位： | 610061成都,四川大学生命科学学院医学遗传研究所,生物资源与生态环境教育部重点实验室 |
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| 摘 要： | 目的 应用引物原位标记(primed in situ labeling,PRINS)代替荧光原位杂交技术对SOX2基因进行快速检测.方法 常规制备人外周血染色体并制片,利用SOX2基因特异性引物在染色体上原位扩增包含生物素标记的探针.用酪胺信号放大(tyramide signal amplification,TSA)生物素系统处理经标记的探针.最后用链霉亲和素-德克萨斯红(streptavidin-Texas red)对生物素信号进行荧光染色,用DAPI染料对染色体进行复染.作为对照,MCF-10F细胞用慢病毒载体转染导人SOX2基因,使用相同的方法检测结合位点.结果 VideoTesT-FISH软件分析提示,实验组3号染色体长臂端有特异红色荧光信号表达,空白组与未经TSA信号处理的对照组则无特异性的红色荧光信号.经过转染的MCF-10F细胞则表现出不同的SOX2基因整合效果.结论 PRINS技术利用高敏感度的原位PCR技术(in situ PCR)结合荧光标记的脱氧核苷酸可在细胞内原位合成形成探针,可大大减少探针的费用与检测的时间,提高检测效率.在诱导多能干细胞的鉴定与分类中具有较为广泛的应用前景.
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| 关 键 词： | 原位杂交 引物原位标记 SOX2基因 |
Rapid detection of SOX2 gene by primed in situ labeling |
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| LUO Xi
,
DING Xian-ping
,
CHEN Lin
,
QUAN Qiang.Rapid detection of SOX2 gene by primed in situ labeling[J].Chinese Journal of Medical Genetics,2012,29(3):289-292. |
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| Authors: | LUO Xi DING Xian-ping CHEN Lin QUAN Qiang |
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| Institution: | Key Laboratory of Bio-resources and Eco-environment, Ministry of Education, Institute of Medical Genetics, College of Life Science, Sichuan University, Chengdu, Sichuan 610041, P. R. China. |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | In situ hybridization Primed in situ labeling SOX2 gene |
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