白念珠菌恒温扩增法的建立及其应用价值

目的 建立一种简单快速检测白念珠菌的环介导等温扩增技术（LAMP），并评价其临床价值。方法 采用Primer Explorer V5软件，针对白念珠菌RPS0基因设计4条引物，对LAMP反应体系和反应条件进行优化，评价检测特异性和最低检测限；收集123例VVC组和42例体检组的女性阴道拭子，平行进行真菌培养、LAMP检测、PCR检测、10%KOH镜检，真菌培养作为VVC诊断参考方法；组间检测方法阳性率的比较采用Pearson 2检验，LAMP、PCR、镜检与培养法的一致性采用Kappa检验，P<0.05为差异有统计学意义；应用ROC曲线分析法评价LAMP、PCR在VVC诊断中的价值。结果 LAMP技术的最适反应温度为61°C，且特异性高，与其他常见菌株无交叉反应，检测下限为103 copies/ul；VVC组和体检组的LAMP、PCR、镜检阳性率有统计学差异（LAMP，2=68.576； PCR，2=64.918；镜检，2=50.076，P<0.01）。LAMP和PCR与培养法有较好的一致性（κ=0.744，κ=0.720），镜检与培养法有较差的一致性（κ=0.533）；LAMP对VVC的诊断敏感性87.62%，特异性88.33%，阳性预测值92.93%，阴性预测值80.30%。LAMP、PCR诊断VVC的曲线下面积分别为0.873、0.888，两者的诊断效能无差异（Z=0.849，P = 0.3956），但LAMP检测时间短于1h。结论 建立了检测白念珠菌的快速可靠、敏感性好、特异性高的LAMP技术。检测时间大大缩短，综合筛查性能优于实验室常规方法，可用于白念珠菌感染的辅助诊断和疗效监控。

Establishment and applicationin in Candida albicans loop-mediated isothermal amplification.