高脂饲养致小鼠胰岛素抵抗对脂肪肝形成的影响

目的：探讨高脂饲养致小鼠脂肪肝形成的机制。方法：随机将8周雄性C57BL/6J小鼠分成高脂饲养组（给予含60%卡路里的高饱和脂肪酸饲养）和正常对照组,饲养12周。监测体重、肝重、血甘油三酯、血总胆固醇、血糖和血胰岛素水平,通过高胰岛素正葡萄糖钳夹实验反映胰岛素敏感性,HE染色、苏丹IV染色及肝脂含量反映肝组织脂质沉积情况,确定高脂饲养致小鼠脂肪肝的形成。通过Westernblot法检测磷酸化胰岛素受体底物1（IRS1）和蛋白激酶B（Akt）水平反映胰岛素信号通路激活情况,检测固醇调节元件结合蛋白1（SREBP-1）和脂肪酸合成酶（FAS）蛋白水平反映肝内脂质合成的情况。结果：高脂饲养组小鼠体重及肝重较正常对照组小鼠明显增加。与正常对照组相比,高脂组血和肝组织内甘油三酯和总胆固醇含量显著升高,血清胰岛素水平升高,葡萄糖输注率减少,磷酸化IRS1和Akt水平降低。肝组织HE染色可见高脂组肝细胞胞浆内充满大量脂肪空泡,苏丹IV染色可见肝细胞内存在大量大小不一的红色脂滴;SREBP-1和FAS蛋白水平明显升高。给予外源性油酸干预原代正常肝细胞48h,磷酸化IRS1和Akt水平呈浓度依赖性减低,而SREBP-1和FAS蛋白表达明显升高。结论：高脂饲养导致小鼠肝脏发生胰岛素抵抗,并通过激活SREBP-FAS脂肪合成途径,促进肝脏脂质沉积,从而诱发脂肪肝。