益气化瘀方联合干细胞移植促进脊髓损伤修复的实验研究※

目的:观察益气化瘀方联合过表达Mash-1修饰的胚胎干细胞对小鼠脊髓损伤的修复作用。方法:采用钳夹法建立小鼠急性脊髓损伤模型,于造模后第3天将Mash-1修饰的胚胎干细胞移植到脊髓损伤部位,并给予益气化瘀方干预。通过观察小鼠的后肢功能评分、脊髓的剩余面积以及神经营养因子、炎症因子和凋亡相关基因的表达改变;并采用免疫荧光检测OCT3/4、nestin、β-tubulin Ⅲ、GFAP的阳性细胞数目,分析移植细胞在体内的存活和分化情况。结果:与模型组比较,益气化瘀方可减少炎症因子TNF-α和凋亡基因caspase-3的表达,轻微提高小鼠运动功能。与单纯干细胞移植组比较,益气化瘀方联合Mash-1修饰胚胎干细胞移植能减少炎症因子TNF-α的基因表达水平,提高移植细胞的存活数量,进而改善小鼠的后肢运动评分。结论:益气化瘀方能减轻脊髓损伤的炎症反应,增加移植细胞在脊髓损伤部位的存活数量,促进脊髓损伤的修复。