| 硫霉素产生菌卡特利链霉菌A520基因文库的构建 |
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| 引用本文： | 向隆宽 王以光 等. 硫霉素产生菌卡特利链霉菌A520基因文库的构建[J]. 中国抗生素杂志, 1998, 23(3): 161-165 |
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| 作者姓名： | 向隆宽 王以光 等 |
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| 作者单位： | 中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所 |
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| 摘 要： | ![]()
以大肠杆菌／链霉菌穿梭柯斯质粒ｐＫＣ５０５为载体，构建了卡特利链霉菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｃａｔｌｅｙａ）Ａ５２０在大肠杆菌ＤＨ１的基因文库，重组质粒插入外源片段的概率在９５％以上，插入外源片段的大小为２０～３０ｋｂ。以链霉菌染色体分子量为１０４ｋｂ计算，由４０００个转化子构成的基因文库可以概括卡特利链霉菌Ａ５２０约９９％的基因组。用已经克隆的硫霉素环化酶基因上游的１．５ｋｂＤＮＡ片段作为探针杂交，从基因文库得到３２个阳性克隆。用利波曼链霉菌（Ｓ．ｌｉｐｍａｎｉ）中的ＩＰＮＳ基因作为探针杂交，从基因文库得到１个阳性克隆ｐＫＷ２０１／ＤＨ１，并为Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交进一步证实杂交片段在ＢａｍＨⅠ２．７ｋｂ片段上。用来自带小棒链霉菌（Ｓ．ｃｌａｖｕｌｉｇｅｒｕｓ）的克拉维酸生物合成途径中的环化酶基因ｃｓ２作为探针杂交进行筛选，得到１个阳性克隆ｐＫＷ３０１／ＤＨ１，说明所构建的基因文库比较完整，并为进一步研究硫霉素产生菌卡特利链霉菌Ａ５２０中抗生素生物合成基因打下了良好基础
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| 关 键 词： | 链霉菌 硫霉素 基因文库 |
Construction of genomic library from Streptomyces cattleya A520 |
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| Xiang Longkuan,Wang Yiguang and Dai Jianlu. Construction of genomic library from Streptomyces cattleya A520[J]. Chinese Journal of Antibiotics, 1998, 23(3): 161-165 |
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| Authors: | Xiang Longkuan Wang Yiguang Dai Jianlu |
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| Abstract: | ![]()
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| Keywords: | Streptomyces Thienamycin Genomic library |
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