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TaqMan探针法荧光定量PCR检测脑脊液细菌方法的建立及应用
引用本文:韩慧,胡子有,姚芳,吴炳义. TaqMan探针法荧光定量PCR检测脑脊液细菌方法的建立及应用[J]. 现代检验医学杂志, 2011, 26(1). DOI: 10.3969/j.issn.1671-7414.2011.01.003
作者姓名:韩慧  胡子有  姚芳  吴炳义
作者单位:南方医科大学南方医院临床医学实验研究中心,广州,510515
基金项目:广东省211工程项目,国家863子课题
摘    要:
目的 建立TaqMan探针法荧光定量PCR检测方法,用于脑脊液标本细菌的快速检测.方法 针对细菌的16S rRNA基因,设计合成细菌的通用引物和革兰阳性菌、革兰阴性菌分型探针,通过构建质粒和制作脑脊液模拟标本来研究引物和探针的检测特异度和敏感度.结果 两种革兰分型探针只对相应的细菌可以检测到荧光信号,乙肝病毒DNA、白色念珠菌及人基因组DNA检测结果均为阴性,此方法最低可以检测到10个拷贝的质粒DNA以及102CFU/ml的金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌.结论 TaqMan探针法荧光定量PCR检测细菌的特异度和敏感度高,检测快速,对脑脊液细菌的早期诊断有重要意义.

关 键 词:TaqMan探针  荧光定量PCR  脑脊液  细菌

Establishment and Applying of TaqMan Probe Real-time PCR for Detection of Bacteria in Cerebrospinal Fluid
HAN Hui,HU Zi-you,YAO Fang,WU Bing-yi. Establishment and Applying of TaqMan Probe Real-time PCR for Detection of Bacteria in Cerebrospinal Fluid[J]. Journal of Modern Laboratory Medicine, 2011, 26(1). DOI: 10.3969/j.issn.1671-7414.2011.01.003
Authors:HAN Hui  HU Zi-you  YAO Fang  WU Bing-yi
Abstract:
Keywords:
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