TGF-β/Smad3信号参与介导TRB3的促肿瘤作用 |
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作者姓名: | 花芳 余娇娇 孙巍 胡卓伟 |
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作者单位: | 中国医学科学院药物研究所,天然药物活性物质与功能国家重点实验室,北京,100050 |
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基金项目: | 国家自然科学基金面上项目,中央级公益性科研院所基本科研创新药物发现与新技术专项 |
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摘 要: | 目的研究TRB3介导的促肿瘤作用与TGF-β/Smad3信号通路的关系。方法利用PCR扩增具有组成活性的Smad3突变体Smad3D,并将其构建至pcDNA3.1/Myc-His(-)B真核表达载体中。在稳定沉默TRB3的HepG2细胞中转染Smad3D-Myc表达质粒,利用G418筛选稳定表达Smad3D-Myc的细胞株。利用双荧光素酶报告基因系统检测3TP-lux转录活性。利用Transwell实验观察细胞侵袭能力变化。结果成功构建Smad3D突变体真核表达质粒。成功建立稳定沉默TRB3,同时稳定表达Smad3D突变体的HepG2细胞株。过表达Smad3D能明显增强3TP-lux转录活性,并在一定程度上逆转沉默TRB3后对肿瘤侵袭的抑制作用。结论 TGF-β/Smad3信号通路参与了TRB3促进肿瘤的作用。
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关 键 词: | TRB3 TGF-β Smad3 Smad3D mutant HepG2 肿瘤侵袭 |
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