低氧及一氧化氮对SW480细胞缺氧诱导因子-1α、VEGF及iNOS 表达的初步研究

目的：观察一氧化氮(NO)对低氧培养的人结肠腺癌细胞株SW480中缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、血管内皮生长因子（VEGF）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）表达的影响。方法：运用免疫细胞化学检测HIF-1α、VEGF、iNOS蛋白表达,Westernblot检测HIF-1α蛋白表达。原位杂交法检测HIF-1αmRNA表达。结果：免疫细胞化学染色图像分析结果显示：低氧组细胞HIF-1α、VEGF和iNOS蛋白表达水平显著高于常氧组(P<0.01,P<0.01,P<0.05)和低氧＋genistein（三羟基异黄酮）组（P<0.01,P<0.05,P<0.05）。低氧条件下,SNP（硝普钠）显著抑制HIF-1α、VEGF蛋白的表达,但对iNOS表达无明显影响;NOC5（NO发生剂）诱导HIF-1α、VEGF、iNOS蛋白的表达;NO抑制剂L-NAME(N-硝基精氨酸甲酯)则抑制3者的表达。Westernblot结果显示：低氧培养条件下,HIF-1α呈强表达,给予genistein能显著抑制其表达;而给予SNP和L-NAME后,蛋白表达量减少,给予NOC5,则蛋白表达增强。原位杂交结果显示：常氧组、低氧组及低氧＋genistein组、低氧＋SNP组、低氧＋NOC5组、低氧＋L-NAME组HIF-1αmRNA表达A值组间均无显著差异。结论：低氧诱导SW480细胞HIF-1α蛋白表达量增高,从而上调VEGF和iNOS表达。低氧条件下,NO供体SNP抑制SW480细胞HIF-1α蛋白及VEGF表达,而另一种供体NOC5则促进HIF-1α表达,两种供体对HIF-1表达的影响可能存在不同的机制。