| 人心肌肌钙蛋白ⅠcDNA的克隆及分泌表达 |
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| 引用本文： | 吴国球,沈子龙,汪兴生,劳心珍,芦慧霞.人心肌肌钙蛋白ⅠcDNA的克隆及分泌表达[J].药物生物技术,2003,10(2):65-67. |
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| 作者姓名： | 吴国球 沈子龙 汪兴生 劳心珍 芦慧霞 |
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| 作者单位： | 1. 中国药科大学生物技术中心
2. 东南大学附属中大医院检验科,南京,210009 |
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| 摘 要： | 克隆人心肌肌钙蛋白I(cTnI)基因全序列,并进行分泌表达.从人心肌组织提取总RNA,经逆转录得到cDNA第一链,以此为模板,PCR扩增目的条带,重新设计上游引物,用相同PCR程序完成点突变;突变后PCR产物克隆入Pfd5载体,并用PCR、SpeI+YhoI双酶切、载体测序等方法鉴定;用ITPG诱导cTnI的表达.PCR扩增出630 bp左右条带,Pfd5-cTnI融合表达载体用PCR、SpeI+XhoI双酶切均可见630bp左右条带,测序结果与预期序列一致;诱导后培养基及细胞周质均检测到cTnI蛋白免疫原活性.人心肌肌钙蛋白I得到成功表达.
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| 关 键 词： | 肌钙蛋白Ⅰ 克隆 分泌表达 |
| 文章编号： | 1005-8915(2003)02-0065-03 |
| 修稿时间： | 2002年9月2日 |
Cloning and Secretive Expression of cDNA of Human Cardiac Troponin Ⅰ |
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