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| TRMT61A在肝癌细胞中的功能及其机制研究 | |
| 作者姓名： | 胡哲轩 张欣 沃璐璐 李静池 王娇 周佽想 赵倩 |
| 作者单位： | 1. 上海交通大学医学院病理生理学系细胞分化与凋亡教育部重点实验室;2. 中国医学科学院应激与肿瘤创新单元(2019RU043) |
| 基金项目： | 国家自然科学基金(81772831)~~； |
| 摘 要： | 目的·探究N1-甲基腺苷(N1-methyladenosine,m1A)甲基转移酶催化亚基(tRNA methyltransferase 61 Homolog A,TRMT61A)对肝癌细胞功能的影响及其潜在机制。方法·通过生物信息学软件分析TCGA数据库中TRMT61A在肝细胞肝癌患者样本中的表达情况并绘制相关生存曲线。通过CRISPR-Cas9技术构建稳定敲低TRMT61A表达的肝癌细胞系Huh7细胞和HepG2细胞,通过蛋白质印记法(Western blotting)检测对照组和敲低组细胞TRMT61A蛋白水平;通过斑点印迹实验检测2组细胞总RNA的m1A修饰水平。利用CCK-8法和平板克隆形成实验检测2组细胞增殖能力。使用碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色和流式细胞术检测细胞周期;通过Western blotting检测细胞周期相关蛋白表达水平。使用Annexin V/PI细胞凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡情况;通过Western blotting检测细胞凋亡相关蛋白表达水平。结果·经生物信息学软件分析,TCGA数据库... |
| 关 键 词： | N1-甲基腺苷甲基化修饰 TRMT61A 肝细胞肝癌 细胞增殖 细胞凋亡 |