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| 人膀胱癌BLZ211细胞cDNA文库的构建分析 | |
| 引用本文： | 陈玲,李旭,陈葳. 人膀胱癌BLZ211细胞cDNA文库的构建分析[J]. 中国医院用药评价与分析, 2007, 7(1): 61-64 |
| 作者姓名： | 陈玲 李旭 陈葳 |
| 作者单位： | 1. 西安交通大学医学院附属第一医院肿瘤科,西安市,710061 2. 西安交通大学医学院附属第一医院试验医学中心,西安市,710061 |
| 摘 要： | 目的:构建人膀胱癌BLZ211细胞表达型cDNA文库,为肿瘤抗原的筛选奠定工作基础。方法:提取BLZ211细胞总RNA,分离mRNA,反转录合成双链cDNA,削平cDNA末端,连接EcoRI适配子,磷酸化EcoRI适配子5′端,XhoI酶切,Sephacryl-S400柱除去小于400bpcDNA片段,与λZAP表达载体连接,包装蛋白包装后建成cDNA文库;取出1μl倍比稀释感染大肠杆菌XL1-Blue-MRF’,测定文库大小、重组率;随机挑取7个噬斑,在ExAssist辅助性噬菌体的作用下,释放出PBK-CMV噬菌粒;感染大肠杆菌XLOLR,铺于卡那霉素抗性的LB平板;挑取克隆,37℃震摇过夜;抽提质粒,经EcoRI和XhoI酶切后,初步确定片段的大小及多样性。结果:构建成含1.39×106重组子的BLZ211细胞cDNA文库,重组子平均插入外源片段长约1.3kb。结论:所建文库合格,适合用于筛选目的cDNA克隆。 |
| 关 键 词： | BLZ211细胞株 膀胱癌细胞株 cDNA表达文库 |
| 文章编号： | 1672-2124(2007)01-0061-04 |
| 修稿时间： | 2006-11-08 |
Analysis of Construction of cDNA Library from Human Bladder Cancer BLZ211 Cells |
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| CHEN Ling,LI Xu,CHEN Wei. Analysis of Construction of cDNA Library from Human Bladder Cancer BLZ211 Cells[J]. Evaluation and Analysis of Drug-Use in Hospital of China, 2007, 7(1): 61-64 | |
| Authors: | CHEN Ling LI Xu CHEN Wei |
| Abstract: | |
| Keywords: | BLZ211 cell line bladder cancer cell line cDNA expression library |
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