葛根芩连汤联合益生菌对溃疡性结肠炎小鼠肠道菌群及相关炎症因子的影响

目的 探讨葛根芩连汤联合益生菌对溃疡性结肠炎小鼠肠道菌群及相关炎症因子的影响。方法 将45只雄性C57BL/6小鼠随机分为7组,即正常组,模型组,美沙拉嗪组(0.6g·kg^-1),益生菌组(0.3 g·kg^-1)及益生菌联合葛根芩连汤低、中、高剂量组(2.54、5.08、10.16 g·kg~^-1)。除正常组外,其余各组通过自由饮用3%葡聚糖硫酸钠溶液连续7 d,再饮水7 d进行造模,整个实验共重复4个循环。在造模第35日依据疾病活动指数评分将造模失败的小鼠进行剔除,其余小鼠按分组进行给药,均给药21 d。造模及给药期间每周两次记录小鼠体重、DAI评分;实验结束后记录结肠长度,采用HE染色观察结肠组织病理学变化并进行组织病理学评分;采用ELISA法检测血清中IL-6、TNF-α、IL^-10的表达;通过肠道粪便16S rRNA测序对小鼠肠道菌群多样性进行分析。结果 与模型组相比,各给药组小鼠体重升高、DAI评分降低,且结肠长度恢复,病理评分降低,联合给药中、高剂量组恢复效果较显著（P <0.05）,且结果呈剂量依赖性;联合给药各组促炎因子IL-6、 TNF-α的表达水平显著下调,而抑炎因子IL^-10的表达水平显著上调（P <0.01）,结果呈剂量依赖性;肠道菌群alpha多样性及beta多样性结果表明各给药组间群落物种组成及物种丰富度已经发生了变化,模型组表现为物种丰度降低,而益生菌组及联合给药中剂量组可显著恢复物种丰富度（P <0.01）;基于门水平小鼠肠道内优势菌群为厚壁菌门（Firmicutes）、拟杆菌门（Bacteroidota）,且联合给药组可显著上调F/B的水平;属水平物种相对丰度分析得出联合给药组可显著回调有益菌属如Muribaculaceae、毛螺菌属NK4A136（Lachnospiraceae＿NK4A136＿group）、另枝菌属（Alistipes）、罗氏菌属（Roseburia）、乳酸杆菌属（Lactobacillus）等的丰度并显著下调条件致病菌属如拟杆菌属（Bacteroides）、大肠埃希菌属（Colidextribacter）、梭状芽杆孢菌属UGG-014（Clostridia＿UCG-014）的丰度（P <0.05）,调节肠道菌群恢复稳态。结论 葛根芩连汤联合益生菌在改善溃疡性结肠炎小鼠肠道菌群失衡、恢复结肠长度、修复结肠病理损伤、抑制促炎症因子表达等均具有积极作用。