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| MDR1基因短发卡样RNA表达载体逆转K562/A02人白血病细胞多药耐药的研究 | |
| 引用本文： | Xiao XB,Xie ZX,Qin Q. MDR1基因短发卡样RNA表达载体逆转K562/A02人白血病细胞多药耐药的研究[J]. 中华肿瘤杂志, 2006, 28(6): 422-425 |
| 作者姓名： | Xiao XB Xie ZX Qin Q |
| 作者单位： | 1. 410008,长沙,中南大学湘雅医院血液科 2. 410008,长沙,中南大学湘雅医院药剂科 |
| 摘 要： | 目的构建MDR1基因短发卡样RNA(shRNA)真核表达载体,观察对K562/A02人白血病细胞株MDR1基因的沉默作用以及对P-糖蛋白(P-gp)表达及功能的影响。方法以基因重组技术构建表达质粒,转染重组质粒pEGFP-C1/U6/MDR1-A和pEGFP-C1/U6/MDR1-B至K562/A02细胞株,通过半定量RT-PCR和蛋白质印迹法,检测MDR1基因表达及P-gp表达水平的变化;以MTT法检测阿霉素(ADM)对K562/A02细胞的半数抑制浓度(IC_(50));高效液相色谱(HPLC)法检测细胞内ADM含量。结果构建的2种重组质粒pEGFP-C1/U6/MDR1-A和pEGFP-C1/U6/MDR1-B均明显抑制K562/A02细胞株MDR1基因表达,抑制率最高为48．2%±2．5%;同时抑制P-gp蛋白的表达,抑制率最高为50．67%。对ADM药物敏感性的相对逆转效率分别为40．8%和62．4%;同时使K562/ A02细胞内ADM含量增加。结论shRNA表达载体可明显抑制K562/A02细胞MDR1 mRNA的转录和P-gp蛋白的表达,增加K562/A02细胞内ADM含量,恢复K562/A02细胞对化疗药物的敏感性,逆转MDR1基因编码蛋白P-gp介导的多药耐药。 |
| 关 键 词： | MDR1基因 真核表达载体 K562／A02人白血病细胞株 P-糖蛋白 多药耐药 |
| 收稿时间： | 2005-06-03 |
| 修稿时间： | 2005-06-03 |
Reversal of multidrug resistance by MDR1 shRNA expression vector in human leukemia K562/A02 cells |
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| Xiao Xi-Bin,Xie Zhao-Xia,Qin Qun. Reversal of multidrug resistance by MDR1 shRNA expression vector in human leukemia K562/A02 cells[J]. Chinese Journal of Oncology, 2006, 28(6): 422-425 | |
| Authors: | Xiao Xi-Bin Xie Zhao-Xia Qin Qun |
| Affiliation: | Department of Hematology, Xiangya Hospital, Central South University, Changsha 410008, China. xzxchangsha@tom.com |
| Abstract: | |
| Keywords: | MDRI gene Eukaryotic expression vector Human leukemia cell line K562/A02 P-glycprotein Multidrug resistance |
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