CPNE7通过上皮间质转化影响胃癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的:探讨CPNE7在胃癌组织和细胞中的表达及影响胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制。方法:基于生物信息学数据库GEPIA 从转录水平分析CPNE7在胃癌及癌旁正常组织中的表达差异。qRT-PCR法检测CPNE7在3种胃癌细胞系(AGS、MKN-45、HGC-27)和胃黏膜正常上皮细胞(GES-1)中的表达，选择表达量相对较高的AGS细胞作为后续实验细胞。通过慢病毒转染AGS细胞敲减CPNE7的表达，根据不同处理分为RNAi-vector组、RNAi-1组、RNAi-2组、RNAi-3组，qRT-PCR、Western blot验证细胞转染效率，选择敲减效率最有效的RNAi-1(实验组)和RNAi-vector(对照组)进行后续实验。采用CCK-8法检测细胞活力，EdU和克隆形成实验检测细胞增殖和克隆形成能力，划痕愈合实验和Transwell实验检测细胞迁移与侵袭能力，Western blot检测细胞凋亡相关蛋白(Caspase3、Caspase7、Caspase9、Bax、Bcl-2)及上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白（E-cadherin、N-cadherin、Vimentin)的表达水平。结果:CPNE7在胃癌组织中的表达明显高于正常组织(P＜0.05)。与正常胃黏膜上皮细胞(GES-1)相比较，CPNE7在胃癌细胞中明显高表达(P＜0.05)，在AGS胃癌细胞中CPNE7相对表达量最高（P＜0.001)。与RNAi-vector组相比较，敲减CPNE7可抑制胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭（P＜0.05)。与RNAi-vector组相比较，敲减CPNE7可上调细胞凋亡相关蛋白Caspase3、Caspase7、Caspase9、Bax的表达，下调Bcl-2的表达（P＜0.05)。与RNAi-vector组相比较，敲减CPNE7可增加上皮标志物蛋白(E-cadherin)的表达水平(P＜0.01)，降低间质标志物蛋白(N-cadherin、Vimentin)的表达水平（P＜0.01)。结论:CPNE7在胃癌组织和细胞中表达上调，敲减CPNE7可通过影响EMT进程抑制胃癌细胞增殖、迁移与侵袭，其可能成为胃癌的潜在分子标志物。

CPNE7 affects the proliferation,migration and invasion of gastric cancer cells through epithelial-mesenchymal transition