| 生长相关蛋白GAP-43多肽抗体的制备 |
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| 引用本文： | 姬志娟,盛树力,王蓉,赵志炜,张景艳,孟祥宏,张旭.生长相关蛋白GAP-43多肽抗体的制备[J].中国比较医学杂志,2010,20(8):22-25,80. |
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| 作者姓名： | 姬志娟 盛树力 王蓉 赵志炜 张景艳 孟祥宏 张旭 |
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| 作者单位： | 首都医科大学宣武医院中心实验室,神经变性病教育部重点实验室,北京,100053 |
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| 基金项目： | 国家"十一五"863计划"疫苗与抗体工程"，首都医学发展科研基金，北京市卫生系统高层次卫生技术人才计划资助项目 |
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| 摘 要： | 目的对生长相关蛋白-43（growth associated proteins-43,GAP-43）进行抗原表位分析并制备兔多克隆抗体。方法通过对GAP-43 cDNA序列及氨基酸序列的结构进行生物信息分析,依据蛋白质的二级结构、亲水性、疏水性、抗原性及理化特性,经过同源性检索后,综合考虑抗体设计的其他因素,选出具有免疫活性的抗原决定簇多肽片段,采用有机固相多肽合成法合成了GAP-43的多肽片段,并与载体蛋白血蓝蛋白（KLH）偶联制备成抗原,免疫新西兰家兔。结果 ELISA测定GAP-43抗体效价为1∶32 000;Western blot检测结果显示：在分子量25kDa出现单一条带;免疫组织化学法检测显示：GAP-43蛋白在小鼠海马神经元中有表达;免疫细胞化学法检测显示：GAP-43蛋白在人神经母细胞瘤株SH-SY5Y中存在表达。结论利用生物信息学软件比较准确地预测GAP-43的抗原决定簇,并成功制备了高效价、高特异性的多肽抗体。
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| 关 键 词： | 生长相关蛋白-43 多肽合成 抗体制备 |
Preparation of Growth Associated Proteins-43(GAP-43)Polyclone Antibody |
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| JI Zhi-Juan,SHENG Shu-Li,WANG Rong,ZHAO Zhi-Wei,ZHANG Jing-yan,MENG Xiang-hong,ZHANG Xu.Preparation of Growth Associated Proteins-43(GAP-43)Polyclone Antibody[J].Chinese Journal of Comparative Medicine,2010,20(8):22-25,80. |
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| Authors: | JI Zhi-Juan SHENG Shu-Li WANG Rong ZHAO Zhi-Wei ZHANG Jing-yan MENG Xiang-hong ZHANG Xu |
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| Institution: | JI Zhi-Juan,SHENG Shu-Li,WANG Rong,ZHAO Zhi-Wei,ZHANG Jing-yan,MENG Xiang-hong,ZHANG Xu Central Laboratory,Key laboratory for Neurodegenerative Diseases of Ministry of Education,Xuanwu Hospital of Capital Medical University.Beijing 100053,China. |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | GAP-43 Peptide synthesis Antibody preparation Mouse Rat |
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