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IL-4诱导THP-1细胞表达DC-SIGN的信号通路调节研究
引用本文:程林芳,靳昌忠,吴丽娟,汪伊洁,王娟,姚航平,吴南屏.IL-4诱导THP-1细胞表达DC-SIGN的信号通路调节研究[J].中华微生物学和免疫学杂志,2012,32(6).
作者姓名:程林芳  靳昌忠  吴丽娟  汪伊洁  王娟  姚航平  吴南屏
作者单位:1. 浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室,杭州,310003
2. 台州学院医学院护理系
3. 浙江大学医学院
基金项目:国家自然科学基金,十二五科技重大专项
摘    要:目的 研究IL-4诱导THP-1细胞表达DC-SIGN的信号调节通路,探索DC -SIGN表达的信号调控网络.方法 以佛波脂(PMA)刺激THP-1细胞24h后加入IL-4作用48 h诱导DC-SIGN的表达,并设ERK阻断剂、NF-κB阻断剂、JAK-STAT阻断剂和MAPK阻断剂处理组.用RT-PCR检测DC-SIGN的mRNA表达,Western blot检测胞质内DC-SIGN蛋白的表达,流式细胞术检测细胞表面DC-SIGN的表达.另外,提取IL-4诱导0、10、20、30、60和120 min的THP-1细胞胞质和胞核蛋白,Western blot检测不同信号通路的信号蛋白及其磷酸化蛋白的变化.结果 IL-4可以大幅提高DC-SIGN在THP-1细胞上的表达,包括mRNA和胞膜蛋白水平.在mRNA、胞质和细胞表面蛋白表达3个水平上,ERK通路阻断剂阻断效果最好,几乎完全阻断了IL-4的诱导效果,JAK-STAT和NF-κB通路阻断剂具有部分阻断效果,而p38通路阻断剂无阻断效果.信号蛋白检测结果显示,IL-4诱导0~120 min内,胞质磷酸化ERK1/2、磷酸化STAT6以及NF-κBp65、NF-κBp50、磷酸化IKB和磷酸化AKT随时间推移浓度逐渐升高,而p38MAPK及其磷酸化蛋白浓度无明显改变.胞核内胞质磷酸化ERK1/2、磷酸化STAT6以及NF-κBp65和NF-κBp50随时间推移浓度逐渐升高.结论 ERK、JAK-STAT和NF-κB通路参与了DC-SIGN启动子的活化,其中以ERK通路为主.

关 键 词:IL-4  DC-SIGN  THP-1细胞  信号通路

IL-4 induced signal pathways regulating DC-SIGN expression in THP-1 cells
CHENG Lin-fang , JIN Chang-zhong , WU Li-juan , WANG Yi-jie , WANG Juan , YAO Hang-ping , WU Nan-ping.IL-4 induced signal pathways regulating DC-SIGN expression in THP-1 cells[J].Chinese Journal of Microbiology and Immunology,2012,32(6).
Authors:CHENG Lin-fang  JIN Chang-zhong  WU Li-juan  WANG Yi-jie  WANG Juan  YAO Hang-ping  WU Nan-ping
Abstract:
Keywords:IL-4  DC-SIGN  THP-1  Signal pathways
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