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雷公藤单加氧酶基因全长克隆及表达分析
引用本文:周家伟,刘雨佳,胡添源,张逸风,高,伟,黄璐琦.雷公藤单加氧酶基因全长克隆及表达分析[J].世界中医药,2018(2).
作者姓名:周家伟  刘雨佳  胡添源  张逸风      黄璐琦
作者单位:首都医科大学中医药学院中医络病研究北京市重点实验室;中国中医科学院中药资源中心道地药材国家重点实验室培育基地;
基金项目:“十三五”时期北京市属高校高水平教师队伍建设支持计划项目(CIT&TCD20170324);市教委科技+社科计划重点项目(KZ201710025022);国家自然科学基金面上项目(81773830)
摘    要:目的:单加氧酶(Monooxygenase,MO)是一类通过在底物上加一个氧原子的加氧酶,在动植物体内参与多种代谢途径。本实验致力于从雷公藤转录组数据中克隆得到单加氧酶基因c DNA全长,并对克隆得到的MO基因进行初步的功能分析。方法:通过对雷公藤转录组数据中筛选得到MO基因片段设计特异性引物,克隆MO基因c DNA全长,通过生物信息学方法对得到的MO基因进行分析,主要包括多重序列比对,蛋白结构预测和构建进化树分析等。结果:根据分析结果Tw MO基因全长为2 193 bp,共编码507个氨基酸,等电点为8.84,相对分子质量为55.20 k Da,多重序列比对显示它与其他植物的MO基因具有较高的同源性。雷公藤悬浮细胞经外源茉莉酸甲酯(Me JA)诱导后,实时荧光定量结果显示,TwMO的表达量明显增加,并在48 h达到最高,提示Tw MO基因与雷公藤的次生代谢产物的生成有关。结论:本研究首次从雷公藤悬浮细胞中克隆得到MO基因,为进一步研究该基因的功能奠定基础。

关 键 词:雷公藤  克隆  基因  单加氧酶  表达分析
收稿时间:2017/12/5 0:00:00

Cloning and mRNA Expression Analysis of Monooxygenase Gene from Tripterygium wilfordii
Zhou Jiawei,Liu Yuji,Hu Tianyuan,Zhang Yifeng,Gao Wei,Huang Luqi.Cloning and mRNA Expression Analysis of Monooxygenase Gene from Tripterygium wilfordii[J].World Chinese Medicine,2018(2).
Authors:Zhou Jiawei  Liu Yuji  Hu Tianyuan  Zhang Yifeng  Gao Wei  Huang Luqi
Institution:1 Key Laboratory of Collateral Diseases,School of Traditional Chinese Medicine,Capital Medical University,Beijing 100069,China; 2 State Key Laboratory of Dao-di Herbs,National Resource Center for Chinese Materia Medica,Chinese Academy of Chinese Medical Sciences,Beijing 100700,China
Abstract:
Keywords:Tripterygium wilfordii  Clone  Gene  Monooxygenase  Expression analysis
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