| 摘 要： | ![]()
程序性细胞死亡(programmed cell death,PCD)是一主动性细胞“自杀”过程,是细胞内部基因引导的一系列精密生化级联反应的结果。凋亡(apoptosis)是PCD的形态学指征,探讨何种基因并以何种途径诱发PCD是当前研究的热点,也是本研究的动机。基因转导是从分子水平研究基因调控的一种手段。本研究采用基因转导法结合电镜观察细胞凋亡,选择的目的基因分别是构建在真核表达载体pMAMneo中人TGF-β1cDNA基因全长,采用磷酸钙共沉淀法,体外转染贴壁生长的人肺巨细胞癌PLA-801D株细胞,以及构建在逆转录病毒载体pDORneo中的反义c-myc、反义bcr/abl基因片段,采用Lipofectin体外转染悬浮培养的人白血病HL-60或K562细胞,除进行一系列分子细胞生物学指标的检测外,重点对转染后不同阶段细胞进行了透射电镜观察。结果发现转染TGF-β1的人肺癌细胞多呈现典型的“凋亡”改变;核异染质凝聚呈“半月形”、细胞出芽(budding),形成大量“凋亡小体”,胞浆细胞器尚完好,凋亡小体内亦见完整压扁的细胞器,并可见吞噬有染色质凝块的癌细胞,而转染反义c-myc,反义bcr/abl的HL-60或K562细胞更多出现核“新月体”,亦见“球形”、“面包圈”状凝聚异染质,并见吞噬“凋亡小体”现象。转染TGF-β1细胞DNA电泳呈现的“DNA梯带”更进一步证实上述
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