| 弓形虫cDNA文库的构建 |
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| 引用本文： | 夏爱娣 徐克继. 弓形虫cDNA文库的构建[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 1996, 14(2): 124-127 |
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| 作者姓名： | 夏爱娣 徐克继 |
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| 作者单位： | 上海第二医科大学 |
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| 摘 要： | ![]()
目的：建立弓形虫ｃＤＮＡ文库。方法：用异硫氰酸胍酸性一步法提取弓形虫（ＲＨ株）ＲＮＡ，含ＰｏｌｙＵ的ｍＲＮＡ亲和膜分离Ｐｏｌｙ（Ａ）＋ＲＮＡ，进而合成双链ｃＤＮＡ。将ｃＤＮＡ与ＥｃｏＲＩ／ＮｏｔＩ接头连接，再与表达载体λｇｔ１１ＤＮＡ臂连接，经体外包装，感染大肠杆菌Ｙ１０９０。以３２ｐ标记的弓形虫ＲＨ株基因组ＤＮＡ为探针，对重组噬菌斑进行原位杂交。结果：ｃＤＮＡ产物分布在０．５－２ｋｂ，得到６．９７×１０５重组子，重组率为９８．７３％，克隆效率为６．９７×１０６克隆／μｇｃＤＮＡ。噬菌斑原位杂交的阳性斑点占重组克隆９５．２％。结论：用异硫氰酸胍酸性一步法提取弓形虫ＲＮＡ简便有效，已建立了一个容量大、质量好的弓形虫ｃＤＮＡ文库。
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| 关 键 词： | 弓形虫 mRNA cDNA文库 克隆 |
CONSTRUCTION OF cDNA LIBRARY OF TOXOPLASMA GONDII |
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| Xia Aidi ,Wang Kemin ,Zhao Hanfang ,Xu Keji ,Yang Huizhen ,Chen Shishu. CONSTRUCTION OF cDNA LIBRARY OF TOXOPLASMA GONDII[J]. Chinese Journal of Parasitology and Parasitic Diseases, 1996, 14(2): 124-127 |
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| Authors: | Xia Aidi Wang Kemin Zhao Hanfang Xu Keji Yang Huizhen Chen Shishu |
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| Affiliation: | Xia Aidi 1,Wang Kemin 1,Zhao Hanfang 1,Xu Keji 2,Yang Huizhen 2,Chen Shishu 1 1 Department of Biochemistry,Laboratory of Molecular Biology,2 Department of Parasitology,Shanghai Second Medical University,Shanghai 200025 |
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| Abstract: | ![]()
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| Keywords: | Toxoplasma gondii mRNA cDNA library clone |
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