| HABP1基因慢病毒干扰和表达载体的构建及表达 |
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| 引用本文： | 苑博,张晓芳,陈雅倩,田芳,闫雪苗,刘运德,岳丹. HABP1基因慢病毒干扰和表达载体的构建及表达[J]. 临床检验杂志, 2013, 31(10): 782-785 |
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| 作者姓名： | 苑博 张晓芳 陈雅倩 田芳 闫雪苗 刘运德 岳丹 |
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| 作者单位： | 天津医科大学医学检验学院，天津300203;天津医科大学总医院检验科，天津300052;天津医科大学医学检验学院，天津300203;天津医科大学医学检验学院，天津300203;天津医科大学医学检验学院，天津300203;天津医科大学医学检验学院，天津300203;天津医科大学医学检验学院，天津300203 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金青年基金资助项目（81202308）；天津市应用基础与前沿技术研究计划青年基金项目（12JCQNJC07800）；教育部博士点基金资助项目（20111202120016）。 |
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| 摘 要： | 摘要：目的：构建慢病毒介导的透明质酸结合蛋白1基因（HABP1）干扰载体及表达载体，建立HABP1降表达及过表达的稳定肾癌细胞系786-0。 方法：合成人HABP1基因短发夹RNA(shRNA)干扰序列，与慢病毒载体pLKO.1-TRC连接产生重组质粒pLKO.1-shHABP1;双酶切质粒pCDNA3.1(-)-HABP1-Flag，将目的基因片段连接到pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro载体上，组成重组表达载体pCDH-HABP1；酶切鉴定及DNA测序后，转染293T细胞，收集慢病毒颗粒感染786-0细胞，嘌呤霉素筛选稳定细胞系，western blot验证HABP1蛋白的表达水平。 结果：构建成干扰载体pLKO.1-shHABP1及表达载体pCDH-HABP1；与随机序列对照组比较pLKO.1-shHABP1转染的786-0细胞HABP1表达水平(0.30±0.01)明显降低(t=25.98,P<0.05)，pCDH-HABP1转染786-0细胞后，HABP1的表达水平（3.20±0.40）明显升高(t=10.34,P<0.05)。 结论：成功构建HABP1基因的干扰载体及表达载体，且786-0细胞可稳定降表达及过表达HABP1。
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| 关 键 词： | 透明质酸结合蛋白1；肾癌细胞；慢病毒载体 |
| 收稿时间： | 2013-09-03 |
Construction and identification of the lentivirus vectors which interfere or increase the expression of HABP1 gene |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | hyaluronan binding protein 1 renal carcinoma cell lentivirus vector |
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