| MMP-2基因RNAi重组慢病毒的构建 |
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| 引用本文： | 刘鸣,姜二华,孙亚男,金德均,田霖丽.MMP-2基因RNAi重组慢病毒的构建[J].哈尔滨医科大学学报,2007,41(6):521-523. |
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| 作者姓名： | 刘鸣 姜二华 孙亚男 金德均 田霖丽 |
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| 作者单位： | 1. 哈尔滨医科大学第二临床医学院,耳鼻咽喉科,黑龙江,哈尔滨,150081
2. 集贤县人民医院,耳鼻咽喉科,黑龙江,集县,155900 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金
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黑龙江省杰出青年科学基金
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黑龙江省教育厅海外学人科研(合作)基金
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哈尔滨医科大学第二临床医学院博士启动基金 |
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| 摘 要： | 目的 构建MMP-2基因RNAi重组慢病毒,以便客观研究该基因的作用.方法 筛选确定的MMP-2基因RNAi有效靶序列,合成靶序列的Oligo DNA,退火形成双链DNA,与含H1启动子和绿色荧光蛋白(GFP)的pLVTHM载体连接产生LV2siMMP-2慢病毒载体,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定.用LV2siMMP-2,pCMV2dR8.74和pMD2G3质粒共转染包装细胞293T细胞,包装产生慢病毒,以293T细胞GFP蛋白的表达水平测定病毒滴度.结果 PCR和测序证实,成功构建MMP-2 siRNA的慢病毒载体LV2siMMP-2,包装慢病毒,浓缩病毒悬液的滴度为8×1010 TU/L.结论 成功构建人MMP-2基因RNAi慢病毒载体,为后期研究MMP-2基因在肿瘤细胞中的作用机制和基因治疗奠定基础.
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| 关 键 词： | RNA干扰 MMP-2 肿瘤 慢病毒 |
| 文章编号： | 1000-1905（2007）06-0521-03 |
| 收稿时间： | 2007-07-20 |
| 修稿时间： | 2007年7月20日 |
Construction of RNAi lentiviral vector for MMP-2 gene |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | RNA interference MMP-2 neoplasm lentivims |
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