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TRBP分子克隆及其功能初步研究
引用本文:刘湛军,朱颖,于文功,路新枝. TRBP分子克隆及其功能初步研究[J]. 细胞与分子免疫学杂志, 2012, 28(2): 124-126,129
作者姓名:刘湛军  朱颖  于文功  路新枝
作者单位:刘湛军 (中国海洋大学医药学院海洋药物教育部重点实验室,山东青岛,266003) ; 朱颖 (中国海洋大学医药学院海洋药物教育部重点实验室,山东青岛,266003) ; 于文功 (中国海洋大学医药学院海洋药物教育部重点实验室,山东青岛,266003) ; 路新枝 (中国海洋大学医药学院海洋药物教育部重点实验室,山东青岛,266003) ;
摘    要:
目的:构建TRBP原核表达载体,评价表达的重组TRBP蛋白对双链RNA的结合能力。方法:利用RT-PCR扩增小鼠TRBP基因双链RNA结合区,构建其与His标签融合的表达载体,转化E.coli BL21(DE3)菌株,利用Ni-NTA磁珠对重组蛋白进行分离纯化;体外转录合成小鼠肝脏miR-122前体RNA Pre-miR-122,分别利用PAGE电泳和等温量热滴定仪检测TRBP与Pre-miR-122的结合能力。结果:分离纯化得到的重组TRBP蛋白为可溶蛋白,Mr为32 400,结合在NI-NTA磁珠上的TRBP能有效的结合Pre-miR-122。结论:成功建立了TRBP原核表达系统,初步研究了TRBP重组蛋白与双链RNA的结合能力。

关 键 词:RNA结合蛋白TRBP  原核表达  分子间相互作用

Molecular cloning and preliminary functional study of TRBP
LIU Zhan-jun,ZHU Ying,YU Wen-gong,LU Xin-zhi. Molecular cloning and preliminary functional study of TRBP[J]. Chinese journal of cellular and molecular immunology, 2012, 28(2): 124-126,129
Authors:LIU Zhan-jun  ZHU Ying  YU Wen-gong  LU Xin-zhi
Affiliation:* Key Laboratory of Marine Drugs,Ministry of Education,School of Medicine and Pharmacy,Ocean University of China,Qingdao 266003,China
Abstract:
Keywords:RNA binding protein TRBP  prokaryotic expression  intermolecular interactions
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