| 铜绿假单胞菌感应分子对照质粒及整合突变株的构建 |
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| 引用本文： | 马睿,东山康仁,泉川公一,柳原克纪,宫崎义继,河野茂.铜绿假单胞菌感应分子对照质粒及整合突变株的构建[J].上海交通大学学报(医学版),2006,26(9). |
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| 作者姓名： | 马睿 东山康仁 泉川公一 柳原克纪 宫崎义继 河野茂 |
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| 作者单位： | 1. 上海交通大学医学院瑞金医院急诊科,上海,200025
2. 日本长崎大学医学部附属病院第二内科 |
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| 摘 要： | 目的 研究细胞间信息传递机制之一假单胞菌喹诺酮信号(PQS)在铜绿假单胞菌发病机制中的作用.方法 基于基因融合分析在转录研究中的实用性,构建了两种PQS相关对照质粒和整合突变株.一种是酶切质粒pYHP441获得pqsA'-lacZ片段后,亚克隆入质粒miniCTX-1中,构建成pqsA'的阳性表达质粒,随后将构建的质粒,通过双亲交配过程整合入野生型铜绿假单胞菌株PAO-1染色体组中;另一种是通过点特异插入诱变策略,将四环素基因盒插入启动子pqsD和pqsE之间,构建的阴性质粒转化入大肠杆菌S17-1株后,和上述pqsA'阳性表达突变株进行双亲交配过程.结果 针对今后PQS的相关研究,构建得到稳定表达PQS的质粒和阳性突变株作为阳性对照.构建获得pqsA-E启动子敲除质粒和相应PQS表达受阻的整合突变株作为阴性对照.结论 两种质粒和整合突变株的构建成功,使得PQS的相关研究结论具有客观性、精确性和有效性.
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| 关 键 词： | 假单胞菌喹诺酮信号 基因融合分析 基因敲除 |
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