| 人毛乳头细胞HSPC016基因在毕赤酵母中的表达和鉴定 |
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| 引用本文： | 邹锋,郝飞,宋志强,易勇,杨希川,杨斌,叶庆佾. 人毛乳头细胞HSPC016基因在毕赤酵母中的表达和鉴定[J]. 第三军医大学学报, 2005, 27(14): 1481-1483 |
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| 作者姓名： | 邹锋 郝飞 宋志强 易勇 杨希川 杨斌 叶庆佾 |
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| 作者单位： | 第三军医大学,西南医院皮肤科,重庆市皮肤性病研究所,重庆,400038;第三军医大学,医学检验系临床微生物及免疫学教研室,重庆,400038 |
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| 摘 要： | 目的构建人毛乳头细胞HSPC016基因的真核表达载体,诱导其表达并对目的蛋白基本生物学特性进行鉴定.方法用PCR从pET-28a( )/HSPC016中扩增出195 bp目的基因,克隆至酵母表达载体pPIC9K质粒,经酶切鉴定后转化毕赤酵母菌GS115,G418-YPD平板筛选高拷贝转化子,甲醇诱导表达后进行Western blot检测和目的蛋白N-端氨基酸测序鉴定.结果用PCR成功扩增出目的基因;pPIC9K/HSPC016转化GS115用G418-YPD平板筛选高拷贝转化子,甲醇诱导后,SDS-PAGE电泳鉴定:目的蛋白相对分子量约为7.2×103,与理论预测值相吻合;UVP扫描表明目的蛋白表达率约18%;Western blot检测具有良好的免疫反应性;N-端氨基酸测序结果与预期序列完全一致.结论HSPC016基因能通过酵母表达载体pPIC9K及宿主菌GS115进行高效、正确地表达,为研究HSPC016基因在真核细胞水平表达的生物学意义奠定了基础.
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| 关 键 词： | 毛乳头细胞 HSPC016基因 毕赤酵母 真核表达 |
| 文章编号： | 1000-5404(2005)14-1481-03 |
| 修稿时间： | 2005-02-25 |
Expression and identification of HSPC016 gene of human dermal papilla cell by Pichia pastoris expression system |
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| Zou Feng,HAO Fei,SONG Zhi-qiang,Yi Yong,YANG Xi-chuan,YANG Bin,YE Qing-yi. Expression and identification of HSPC016 gene of human dermal papilla cell by Pichia pastoris expression system[J]. Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae, 2005, 27(14): 1481-1483 |
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| Authors: | Zou Feng HAO Fei SONG Zhi-qiang Yi Yong YANG Xi-chuan YANG Bin YE Qing-yi |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | human dermal papilla cell HSPC016 gene Pichia pastoris eukaryotic expression |
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