发酵桔梗急性毒性及药理学实验研究北大核心CSCD

考察发酵桔梗对小鼠的急性毒性及小鼠感染肺炎支原体后咳嗽的作用研究。采用最大给药量(maximum dosage,MAD)对小鼠进行急性毒性实验,观察小鼠体征,14 d后行剖检、血液生化检查和病理组织切片观察。发酵桔梗药理学实验中将60只健康雌、雄各半的BALB/c小鼠随机分为空白组、模型组、喷托维林组(0.013 g·kg^(-1)·d^(-1))、发酵桔梗高剂量组(5.2 g·kg^(-1)·d^(-1))、发酵桔梗中剂量组(2.6 g·kg^(-1)·d^(-1))、发酵桔梗低剂量组(1.3 g·kg^(-1)·d^(-1)),每组10只。除空白组外,其余5组BALB/c小鼠通过鼻腔滴入20μL 1×10^(6 )CCU肺炎支原体进行造模3 d,各组小鼠灌胃给予相应药物7 d;引咳实验观察并记录各组小鼠咳嗽潜伏期及3 min内咳嗽总次数;苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色、Masson染色观察肺组织病理变化;免疫组化观察各组小鼠肺组织瞬时受体电位A1(transient receptor potential A1,TRPA1)、降钙素基因相关肽(calcitonin gene rela-ted-peptide,CGRP)、P物质(substance P,SP)蛋白表达。利用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence-based quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)阐明发酵桔梗对小鼠咳嗽因子TRPA1、CGRP、SP mRNA水平的变化。在急性毒性实验中无小鼠死亡,一般行为学和主要脏器病理学检查等均无变化;与空白组比较,血液生化指标差异无统计学意义。在发酵桔梗药理学实验中,与模型组相比,发酵桔梗高、中剂量组小鼠肺组织结构明显得到改善,结构清晰,组织形态规整。qRT-PCR和免疫组织化学检测显示,发酵桔梗组细胞因子TRPA1、CGRP、SP表达降低。发酵桔梗可通过抑制肺组织TRPA1、CGRP、SP表达从而发挥抑制咳嗽作用,确定了药物作用的靶点。