| RSCA技术应用于HLA-A,B座位高分辨基因分型的研究 |
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| 引用本文： | 邓志辉,吴国光,张旋,周丹,高素青. RSCA技术应用于HLA-A,B座位高分辨基因分型的研究[J]. 中国输血杂志, 2005, 18(4): 296-298 |
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| 作者姓名： | 邓志辉 吴国光 张旋 周丹 高素青 |
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| 作者单位： | 深圳市输血医学研究所,广东深圳,518035 |
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| 基金项目： | 广东省卫生厅科研基金项目课题（编号A2001641） |
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| 摘 要： | 目的采用参比链介导的构象分析(referencestrandmediatedconformationanalysis,RSCA)技术,建立新型、可靠的HLAA、B高分辩基因分型方法,应用于HLA基因分型及供、受者组织配型。方法采用一对座位特异性引物,扩增HLAA、B基因的第2、3外显子和第2内含子。扩增产物与单链标记荧光物质的参比链按一定比例混合,经变性、退火反应及脱水处理后,在杂交产物中掺入分子量内参标准物,用ABI377型基因测序仪电泳检测。用ABIGeneScan3.1软件分析每一泳道内异源双链波峰的迁移值、峰高及峰面积值,RSCAHLATyper1.3软件分析HLA等位基因型。应用本方法,对第13届国际组织相容性协作组(IHW)送检的20份盲检样本,以及2份HLA等位基因型已知的质控样本进行了检测。结果2份质控DNA的检测结果,与已知的HLA基因型完全相符;20份盲检样本HLAA、B座位的检测结果,与IHW公布的结果完全相同,准确率达100%。结论RSCA为新型、高分辨水平的HLA基因分型方法,并且出现模棱两可结果的情况少,分型结果准确、可靠。
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| 关 键 词： | 参比链介导的构象分析(RSCA) HLA-A、B座位 基因分型 高分辨率 |
| 文章编号： | 1004-549X（2005）04-0296-03 |
| 收稿时间： | 2004-07-21 |
| 修稿时间： | 2004-07-21 |
High resolution HLA-A, B typing by RSCA |
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